Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz.Kullandığınız tarayıcı sürümünün CSS desteği sınırlıdır.En iyi deneyim için güncellenmiş bir tarayıcı kullanmanızı (veya Internet Explorer'da Uyumluluk Modunu devre dışı bırakmanızı) öneririz.Bu arada desteğin devamını sağlamak için siteyi stiller ve JavaScript olmadan oluşturacağız.
Travma sonrası stres bozukluğu (TSSB), travmayla ilişkili ipuçlarına verilen korku tepkilerini nötralize etme yeteneğindeki bir bozuklukla karakterize edilir.İnsan ve hayvan çalışmaları, korkuyu bastırmanın başarısını belirleyen temel aracılar olarak frontal korteksin belirli alanlarının katılımındaki farklılıklara işaret etmektedir, ancak bu alanların farklı katılımını belirleyen sinir devrelerinin etkileşimi açık değildir.Yok olma hatırlamasındaki bireysel farklılıkların nöronal devre aktivitesindeki farklılıklara nasıl yansıdığını daha iyi anlamak için, sıçan sublimbik korteksinden (IL) gelen projeksiyonları retrograd izleyicilerle etiketledik ve IL projeksiyon nöronlarının içindeki ve dışındaki nöronal projeksiyonları karşılaştırdık.Bu verileri farelerde silinen hafızanın korunma derecesine göre gruplandırarak analiz ettik.IL yansıtan hücrelerde, arka paratalamustaki nöronların sıçanlarda artan aktivite sergilediğini ve bunun da iyi bir yok olma hatırlama özelliği sergilediğini bulduk.IL yansıtan hücrelere ek olarak, sıçan klostrumu ve ventral hipokampusunun seçilen alanlarında iyi çözünürlükle artan Fos aktivitesi gözlendi.Sonuçlarımız, yok olma hatırlamasındaki farklılıkların, IL projeksiyonlarının içindeki ve dışındaki belirli sinirsel aktivite kalıplarıyla ilişkili olduğunu göstermektedir.
Korku koşullaması, nötr bir uyaran, önleyici koşulsuz bir uyaranla (UCS) ilişkilendirildiğinde ortaya çıkar; öyle ki, başlangıçta nötr olan uyaran, şimdi koşullu uyaran (CS), UCS'nin yokluğunda koşullu bir korku tepkisini (CR) ortaya çıkarır.Koşullu korkunun tersine çevrilmesi, UCS1'in yokluğunda CS'nin tekrar tekrar sunulması nedeniyle CR'den CS'ye bir düşüşle sağlandı.Önceki araştırmalar, travma sonrası stres bozukluğunun (PTSD), koşullu korku tepkilerinin yok oluşunun hatırlanmaması ile ilişkili olduğunu göstermiştir2.Travma sonrası stres bozukluğunun tedavisinde bilişsel davranışçı terapinin temel taşı, öğrenilmiş korku tepkilerinin ortadan kaldırılmasına dayanan maruz bırakma terapisidir3,4.Bu nedenle, kemirgenlerin neslinin tükenme korkusu ve altta yatan sinir mekanizmalarındaki bireysel farklılıklara ilişkin çalışmalar, insanların travmaya tepkileri ve travma sonrası stres bozukluğunun tedavisindeki farklılıkların aydınlatılmasına yardımcı olabilir.Başarılı yok oluş anılarını başarısız anılardan ayıran sinir mekanizmalarının tanımlanmasındaki ilerlemeye rağmen, keşfedilecek çok şey var.
Kemirgen modelleri bu çalışmada faydalıdır çünkü kemirgenlerin yok oluşunun hatırlanmasında önemli bireysel farklılıklar vardır7,8,9,10.Popülasyon düzeyinde korku yok oluşunun nöral mekanizmalarını araştıran önceki çalışma, yok oluşun hatırlanması için infralibik korteksin (IL) aktivasyonunun gerekli olduğunu göstermiştir (refs 11, 12, 13, ancak bkz. 14) ve bazı çalışmalar, korku yok oluşunda azalma bulmuştur. IL'deki kemirgen aktivitesi, çok korkulan kemirgenlerle karşılaştırıldığında neslinin tükenmesine ilişkin zayıf hafıza sergiliyor.Bununla birlikte, IL'lerin kemirgenlerde korkunun ortadan kaldırılmasını kolaylaştırmada, daha zayıf bir yok oluş gösterenlere kıyasla farklı şekilde rol oynadığı mekanizmalar belirsizdir.
Bir olasılık, bireyler arasındaki korku yok olma hafızasındaki farklılıkların, spesifik afferent IL'lerin diferansiyel aktivasyonunun sonucu olmasıdır.Anatomik çalışmalar18 beynin çeşitli kortikal ve subkortikal alanlarının IL'ye yoğun projeksiyonlar gönderdiğini, bunun da beynin birçok bölgesine efferent projeksiyonlar gönderdiğini göstermiştir.Nüfus düzeyindeki çalışmalar, amigdalaya yönelik IL projeksiyonlarının korku yok oluşunun elde edilmesi için önemli olduğunu20,21,22 ve bazolateral amigdaladan (BLA) gelen IL girişinin de yok oluş öğrenmesiyle ilişkili olduğunu göstermiştir.IL merkezli devrelerin yok oluşun hatırlanmasına katılımı konusunda daha az araştırma var, ancak son çalışmalar hem ventral hem de dorsal hipokampusun IL tahmininde rol oynadığını gösteriyor.Görünüşe göre IL'nin talamusun yeniden birleşen çekirdeğine olan efferent projeksiyonları da korkunun yok oluşunun anısına katılıyor.
Bu önceki çalışmalar, yok oluşun geri çağrılmasına dahil olan sinir devrelerinin etkileşiminin bir resmini çizmeye başlıyor, ancak IL merkezli sinir devrelerindeki aktivitenin, yok oluşun geri çağrılmasındaki bireysel farklılıkları etkileyip etkilemediğine dair çok az veri var.Burada, bireyler arasındaki korku yok etme hafızasındaki farklılıkların, belirli beyin bölgelerinde IL girdi aktivasyonundaki değişikliklerle ilişkili olup olmadığını belirlemeye çalıştık.Özellikle talamusun (PVT), klavikula (CLA), BLA ve ventral hipokampusun (vHPC) paraventriküler çekirdeğindeki IL afferent hücrelerinin aktivasyonunu değerlendirdik.Bu beyin bölgeleri hem IL'ye yoğun projeksiyonlar gönderdikleri için hem de korku yok oluşunun ifadesinde rol oynayabileceklerinden şüphelenmek için nedenler olduğu için seçilmiştir18.Örneğin yakın zamanda yapılan bir araştırma, korku edinimi ve üremesinde rol oynadığı bilinen bir bölge olan PVT'nin yok oluşun üremesi için gerekli olduğunu gösterdi.Ek olarak önceki çalışmalar, yok olma hafızasını ifade eden sıçanlarda bazal amigdala ve vHPC aktivitesinin arttığını göstermiştir.Son olarak, önceki çalışmaların hiçbirinin yok oluştaki rolünü değerlendirmediği göz önüne alındığında, klostrumun analizi daha keşfedicidir.Ancak son çalışmalar bunun korkunun bağlamsal koşullanmasında rol oynadığını ileri sürmektedir29.
Viral GFP-konjuge retrograd izleyiciler, davranış testinden önce sıçanların IL'sine enjekte edildi ve IL aferentlerindeki Fos aktivitesi, yok olma tekrarı, korku hatırlama sırasında ve davranış testine tabi tutulmayan sıçanlarda ölçüldü.Sonuçlarımız, posterior paraventriküler talamustan IL'ye olan projeksiyonların, neslinin tükenmesini başarıyla hatırlayan sıçanlarda artan aktivite gösterdiğini göstermektedir.IL tahminlerine ek olarak, iyi gerileyen sıçanlarda klavikula ve ventral hipokampusun belirli bölgelerindeki nöral aktivite arttı.Sonuçlarımız, IL'ye yansıtılan içsel ve dışsal sinirsel aktivite kalıplarının, korku yok etme hafızasındaki bireysel farklılıklarla ilişkili olduğunu göstermektedir.
Charles River Laboratories'den (Raleigh, NC) elde edilen elli dört yetişkin erkek Sprague-Dawley sıçanı (varışta 300-325 g) denek olarak kullanıldı.Sıçanlar, yiyecek ve suya serbestçe erişebilecekleri ve 12 saatlik bir aydınlık/karanlık döngüsünde (ışıklar sabah 7'de açık olacak şekilde) çiftler halinde barındırıldı.Bu deneyler için iki grup sıçan (n = 28 ve n = 26) kullanıldı.Ölümün, cerrahi hatanın, hedef bölgedeki GFP ifadesinin eksikliğinin, zayıf doku kalitesinin ve davranış sorunlarının (Yöntemlerde açıklanan) hariç tutulmasından sonra, yok olma hatırlama grubunda 21 sıçan ve korku hatırlama grubunda ev kafeslerinde 7 sıçan yer aldı.grup 7 sıçandan oluşuyordu (son analize 35 sıçan dahil edildi).Tüm prosedürler Stony Brook Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı ve ARRIVE Yönergeleri (https://arriveguidelines.org) ve NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Yönergeleri'ne uygundu.
Sıçanlar ameliyattan iki gün önce tedavi edildi.Sıçanlara ketamin (87 mg/kg) ve ksilazin (10 mg/kg) ile anestezi uygulandı, stereotaksik bir aparata (Stoelting, Woodale, IL) yerleştirildi ve IL'ye tek taraflı AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) enjeksiyonları yapıldı.(sol ve sağ enjeksiyonları dengeleyin).Enjeksiyon için 22 gauge kanül yerine indirildi (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Dakikada 0,15 µl hızında 0,6 µl virüs iletmek için kılavuz kanüle 28G'lik bir iç kanül (PE 20 tüpü aracılığıyla bir infüzyon pompasına bağlı) yerleştirin ve infüzyon bozulmadan sonra 5 dakika boyunca yerinde bırakın..Dikişler atıldıktan sonra sıçanlara meloksikam (1 mg/kg) enjekte edildi ve hareket edebildikleri anda kafeslerine geri gönderildiler.Sıçanlar, virüsün iyileşmesine ve retrograd taşınmasına izin vermek için yaklaşık 7 hafta boyunca kafeslerinde tutuldu.Üç sıçan anestezi altında öldü ve bunun sonucunda 51 sıçan (%94) ameliyattan başarıyla kurtuldu.
Tüm prosedürler, 45,7 cm x 43,2 cm x 43,2 cm ses emici izolasyon kutularının (Clever Sys. Inc.) içine yerleştirilmiş 32 cm x 25 cm x 21 cm'lik iklimlendirme odalarında (Clever Systems Inc., Reston, VA) gerçekleştirildi.).Yok oluşu öğrenme ve yok oluşu hatırlama oturumları sırasında bağlam, orijinal koşullu bağlamdan farklı olacak şekilde değiştirildi.Koşul A (korku üretimi) 28 volt akkor, ev tipi ampulleri (Chicago Micro Lighting, Birleşik Krallık) içerirken, koşul B (yok olma eğitimi, yok olma hatırlama testi ve korku hatırlama testi) kızılötesi LED lambaları (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) içeriyordu. ., Çin;U48R).Ayrıca Bağlam A'da paslanmaz çelik ve pleksiglas duvarlara sahip titreşim önleyici çıtalı bir zemin bulunurken, Bağlam B'de zemine ve duvarlara yerleştirilmiş boyalı metal parçalar bulunur.Bağlam B şekli de 33,5 cm x 21,3 cm'lik kavisli bir metal parçanın standart bir koşullandırma odasına yerleştirilmesiyle değiştirildi.Ayrıca A bağlamında bölmeler %5 asetik asitle silinirken, B bağlamında bölmeler %5 amonyum hidroksitle silindi.Son olarak, B bağlamında, fareler, arabaların üzerindeki kafeslerde yuvarlanmak yerine kovalarla test odasına getirildi.Davranış oturumları üst kamerayla kaydedildi ve her kameradan gelen video sinyali, piksel değişikliklerine dayalı olarak solma davranışını değerlendiren yazılıma (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) beslendi.Parametreler, bilgisayar tarafından tahmin edilen sönümleme davranışının, manuel olarak tahmin edilen eğitimli gözlemcilerin davranışıyla yakından eşleşeceği şekilde seçilmiştir.30 saniyelik aralıklarla özetlenen dondurma süresinin yüzdesini gösteren bir değer.
Tüm davranışsal programlar, aydınlık/karanlık döngüsünün aydınlık kısmında gerçekleştirilir.Sıçanlar davranışsal prosedürlerin başlamasından 5 gün önce tedavi edildi ve tedavinin son üç günü boyunca davranış odasına nakledildi.Davranış testinin ilk gününde, bir grup yok oluşu geri çağıran fareye korku koşullu refleks uygulandı, ardından A bağlamına yerleştirildi, 6 dakikalık uyarılmamış iklimlendirme süresi verildi ve ardından her iki 4 kHz, 76 dB, 30 saniyelik kombinasyonlar verildi. .ton ve genel sonlandırma, 1,0 mA, vuruş 1 sn (2 dk ITI).Tüm davranışsal eğitimler için sıçanlar, uyaranın son sunumundan 2 dakika sonra kafeslere geri gönderildi.Ertesi gün, yok olma-geri çağırma grubundaki sıçanlar, bağlam odası B'ye yerleştirildi ve 6 dakikalık bir alışma süresinden sonra yok olma eğitimi olarak 20 ses sunumu (2 dakika ITI) gerçekleştirdi.Ertesi gün yok olma üreme grubundaki sıçanlar, yok olma testi olarak 6 dakikalık iklimlendirme periyodundan sonra bağlam B'de 4 tona maruz bırakıldı.Yok olma hafızası grubundaki sıçanlara davranış seansından 60 dakika sonra perfüze edildi.Korku anıları uyandıran bir grup kontrol faresi, A bağlamında korku koşullu tepkinin ilk gününde aynı prosedüre tabi tutuldu. Kırk sekiz saat sonra, fareler B bağlam odasına yerleştirildi ve 4 sesli sunuma (2-2) tabi tutuldu. dakika ITI) hatırlama testi olarak.6 dakikalık alışma süresinden sonra korku.Sıçanlara davranış seansından 60 dakika sonra perfüze edildi.Bir grup evcil kontrol faresi, deney boyunca ev kafeslerinde kaldı ve deney fareleriyle aynı gün perfüze edildi.İki sıçan grubunun her biri iki seriye bölündü ve her gruptaki hayvan sayısı seriler arasında dengelendi.Korku anıları grubundaki bir sıçan, korku koşullanması belirtileri göstermediği için (korku anıları testi sırasında zamanın %15'inden daha azının donması) analizden çıkarıldı.Davranışsal zaman çizelgesinin diyagramı için Şekil 2A'ya bakın.
Sıçanlara Fatal Plus solüsyonu (100 mg/kg) aşırı dozda verildi, ardından buz gibi soğuk %10 PBS ve ardından %10 tamponlu formalin ile perfüze edildi.Beyin çıkarıldı ve yaklaşık 1 hafta boyunca 4°C'de formalin içindeki %30 sakaroz çözeltisinde saklandı.Daha sonra beyin donduruldu ve 40 µm kalınlığında bir kriyostat halinde kesildi.Kesitler sırasıyla %10 PBS'de 4°C'de saklandı.Daha sonra ilgilenilen beyin bölgesini içeren serbest yüzen bölümlere immünofloresan uygulandı.Kesitler, her biri 5 dakika boyunca %10 PBS'de 3 kez yıkandı.Kesitler daha sonra oda sıcaklığında 2 saat boyunca normal keçi serumunun %5 bloklama solüsyonunda inkübe edildi ve daha sonra %10 PBS içerisinde her biri 5 dakika boyunca üç kez daha yıkandı.Daha sonra kesitler, %10 PBS içerisinde %1 BSA içerisinde seyreltilmiş primer antikorlar (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) içerisinde gece boyunca 4°C'de inkübe edildi.Ertesi gün, kesitler 4°C'de 30 dakika boyunca %10 PBS'de yıkandı, ardından %10 PBS'de 3 kez 5 dakika süreyle yıkandı ve ikincil bir antikorla (Alexa Fluor 594 keçi anti-tavşan, kırmızı konjugat, 1:500) inkübe edildi. ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) oda sıcaklığında 2 saat bekletildi.5 dakika süreyle %10 PBS'de 3 ilave yıkamanın ardından kesitler cam slaytlara yerleştirildi ve Fluoromount-G (Invitrogen) ile kapatıldı.Şekil 3G'deki immün boyamanın temsili görüntülerine bakın.
Bir Infinity3 dijital kamera (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) ve bir Zeiss mikroskobuna bağlı bir ışık motoru (Lumencor, Beaverton, OR) kullanan bir floresan mikroskop, aşağıdakileri içeren bölümler de dahil olmak üzere beynin ilgili her bölgesinden görüntüler elde etmek için kullanıldı. İmmünofloresan olmadan IL.Enjeksiyon bölgesinin doğru yerleştirildiğini doğrulamak için gerçekleştirilir.Hücre sayımı için kullanılan görüntüler 20x büyütmede elde edildi.Her doku bölümü için, GFP'nin görselleştirilmesine olanak tanıyan bir filtreli bir görüntü ve ikincil antikordaki Alexa Fluor kırmızı konjugatının görselleştirilmesine olanak tanıyan bir filtreli bir görüntü alın ve görüntü için görüntüleme yazılımı (Infinity Analiz, sürüm 3) kullanıldı. kaplama.Aynı pozlama süresini kullanarak beynin tüm bölgelerinin tüm görüntülerini elde edin ve ayarları kazanın.Altı fare, virüsün ana bulaşmasının IL dışında meydana gelmesi nedeniyle (%88 isabet oranı) analizin dışında bırakıldı.IL'ye saldıran virüse rağmen, ilgili hedef beyin bölgelerinin tümünde yeterli GFP ifadesi göstermedikleri için sekiz fare daha hariç tutuldu.Ayrıca doku kalitesinin kötü olması nedeniyle bir sıçan çalışma dışı bırakıldı.
Her görüntü için aynı prosedürü kullanarak J görüntüsündeki (NIH) arka plan gürültüsünü azaltmak için parlaklığı ve kontrastı ayarlayın.Toplam retrograd etiketli hücreler, toplam Fos etiketli hücreler ve toplam çift etiketli hücreler için hücre sayımları, Image J sitometre eklentisi kullanılarak hayvanları tanımlamayan deneyci tarafından manuel olarak gerçekleştirildi.Hücre sayımları hücre/mm2 olarak normalleştirildi.IL yansıtan hücrelerde Fos ekspresyonunu analiz etmek için çift etiketli hücrelerin sayısı, retrograd etiketli hücrelerin toplam sayısına göre normalleştirildi.mBLA, mvHPC ve pvHPC analizi için birden fazla 20x görüntüden alınan hücre sayımları toplandı ve hücre/mm2 olarak normalleştirildi.Beyin bölgelerinin geri kalanının analizi için, 20x'lik bir görüntü veya 20x'lik bir görüntünün bir kısmı analiz edildi ve hücre/mm2'ye göre normalleştirildi.vHPC analizi CA1, CA2 ve alt baskın vHPC bölgelerini içeriyordu.Şekil 1, düzlemin ön-arka sınırını belirleyen görüntülerle analiz edilen beyin bölgelerini göstermektedir.
Kısaltmalar ve ilgilenilen beyin bölgelerinin konumu.Makalede verilen beyin bölgelerinin kısaltmalarının ve yerlerinin açıklanması.Swanson (2004) Beyin Haritası: Sıçan Beyninin Yapısı, 3. Baskı'dan alınan kamuya açık beyin haritası, Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 Uluslararası Lisansı (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) kapsamında lisanslanmıştır. ./), https://larrywswanson.com adresinden indirilebilir.
Donma süresi yüzdesinin, ara aralıklar hariç, 30 saniyelik ton çalma süresi üzerinden ortalaması alınır.Yok oluş geri çağırma oranları, yok olma geri çağırma sırasındaki solma süresinin yüzdesi, ilk 4 yok olma eğitim denemesi sırasındaki solma yüzdesi olarak ifade edilerek hesaplandı (dört yok olma geri çağırma tonu sırasında solma/ilk dört yok olma eğitim tonu sırasında solma*100).Düşük puanlar, solma hafızasının iyi olduğunu, yüksek puanlar ise zayıf hafızanın zayıf olduğunu gösterir.Sıçanlar yok oluş hatırlama puanına göre sıralandı; yok olma hatırlama puanının ilk üçte birindeki sıçanlar "kötü yok olma fareleri" olarak sınıflandırıldı ve yok olma hatırlama puanının son üçte ikisindeki sıçanlar "iyi" olarak sınıflandırıldı.Hafızası zayıflayan fareler.
Parametrik olmayan testler, verilerin genellikle normal dağılım ve/veya varyansların homojenliği hakkındaki varsayımları ihlal etmesi nedeniyle kullanılır.Nesli tükenme hatırlama testine tabi tutulan tüm sıçanlarda nesli tükenme hatırlama puanları ile Fos belirteçleri ve beyin ilgi alanlarındaki ikili belirteçler arasında anlamlı bir ilişki olup olmadığını belirlemek için Spearman'ın sıra korelasyonu kullanıldı.İki bağımsız grup arasında fark olup olmadığını belirlemek için Mann-Whitney U testi kullanıldı.Kruskal-Wallis testi, 2 veya daha fazla grubun birbirinden farklı olup olmadığını belirlemek için kullanılırken, Kruskal-Wallis istatistiğinin anlamlı olması durumunda Dunn çoklu karşılaştırma testi kullanılır.Yok olma öğrenimi sırasındaki solma, denekler arası faktör olarak grup ve denek içi faktör olarak test ile tekrarlanan ölçüm varyans analizi kullanılarak değerlendirildi. Tüm istatistiksel testler için p < 0,05 olduğunda sonuçlar anlamlı kabul edildi. Tüm istatistiksel testler için p < 0,05 olduğunda sonuçlar anlamlı kabul edildi. Результаты значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Sonuçlar tüm istatistiksel testler için p < 0,05'te anlamlı kabul edildi.当所有统计检验的p < 0,05 时,结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时,结果被认为是显着的。 Результаты значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Sonuçlar tüm istatistiksel testler için p < 0,05'te anlamlı kabul edildi.
Şekil 2, deneysel zaman çizelgesini (Şekil 2A) ve yok olmaya maruz kalan tüm farelerin frekans dağılımını (Şekil 2B) göstermektedir. İyi ve zayıf yok olma gruplarındaki sıçanlar, hesaplanan bu yok olma hatırlama puanlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0,001) (Şekil 2C). İyi ve zayıf yok olma gruplarındaki sıçanlar, hesaplanan bu yok olma hatırlama puanlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0,001) (Şekil 2C). Крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим рассчитанным показателям инания угашения (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). İyi ve zayıf yok olma gruplarındaki fareler, hesaplanan bu yok olma hatırlama oranlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U=0, p<0,001) (Şekil 2C).U = 0,p <0,001）（图2C) U = 0，p<0,001）（2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​группах сорошим и плохим угашением ельно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Bu hesaplanan yok olma hatırlama oranlarında, iyi ve kötü yok olma gruplarındaki fareler önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0,001) (Şekil 2C).Korku koşullu refleks oturumunun temel periyodu sırasında iyi tükenme, zayıf tükenme ve korku hatırlama olan gruplar arasında donma süresi açısından anlamlı bir fark yoktu (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Şekil 2D).Ek olarak, korku koşullu refleksin ilk tonunun sunumu sırasında, iyi sönme, zayıf sönme ve korku hatırlama olan gruplar arasında donma süresi açısından anlamlı bir fark yoktu (X2(2) = 1,107, p = 0,575), çünkü ikinci tonlardaki korku sırasında olduğu gibi.Koşullandırma oturumu sırasında, iyi yok olma, zayıf yok olma ve korku hatırlama olan gruplar arasında donma süresi açısından anlamlı bir fark vardı (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (Şekil 2D).Temel yok olma eğitim döneminde iyi ve kötü yok olma grupları arasında solma süresinde de önemli bir fark yoktu (U = 45,00, p = 0,799) (Şekil 2D). Daha sonra, yok olma eğitimi oturumu sırasında donma için harcanan süre üzerinde deneme bloğunun (blok başına 5 ton) önemli bir ana etkisi vardı (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), bu, yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösterir (Şekil 2D). ). Daha sonra, yok olma eğitimi oturumu sırasında donma için harcanan süre üzerinde deneme bloğunun (blok başına 5 ton) önemli bir ana etkisi vardı (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), bu, yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösterir (Şekil 2D). ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 ton на блок) на время, затрачиваемое на замира ние во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению дило ( рис.2D). Daha sonra, yok olma eğitimi sırasında donma süresi üzerinde deneme bloğunun (blok başına 5 ton) önemli bir ana etkisi vardı (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), bu da yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösteriyor (Şekil 1). .2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884，54.80）=8.3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884，54.80）=8.3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис .2D). Daha sonra, yok olma öğrenimi sırasında deneme blokları (blok başına 5 ton) sönme süresi üzerinde önemli bir ana etkiye sahipti (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), bu da yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösteriyor (Şekil .2D) .Ancak yok olma grubunun (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) yok olma eğitim süresi boyunca sönme süresi üzerinde önemli bir etkisi olmadı ve deneme bloğu ile yok olma grubu arasında herhangi bir etkileşim yoktu (F(4) , 19)) .76) = 1,890, p = 0,121) (Şekil 2D). Test oturumu sırasında, iyi yok olma, zayıf yok olma ve korku hatırlama grupları arasında temel dönem boyunca donma için harcanan zaman açısından anlamlı bir fark vardı (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), öyle ki korku hatırlama grubu önemli ölçüde dondu iyi yok oluş grubundan daha fazla (Ortalama Sıra Farkı = 10,57, p = 0,017), ancak zayıf yok oluş grubundan değil (Ortalama Sıra Farkı = - 3,714, p > 0,999) (Şekil 2D). Test oturumu sırasında, iyi yok olma, zayıf yok olma ve korku hatırlama grupları arasında temel dönem boyunca donma için harcanan zaman açısından anlamlı bir fark vardı (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), öyle ki korku hatırlama grubu önemli ölçüde dondu iyi yok oluş grubundan daha fazla (Ortalama Sıra Farkı = 10,57, p = 0,017), ancak zayıf yok oluş grubundan değil (Ortalama Sıra Farkı = - 3,714, p > 0,999) (Şekil 2D).Test oturumu sırasında, iyi yok olma, zayıf yok olma ve korku hatırlama grupları arasında, temel dönem boyunca donmak için harcanan zaman açısından anlamlı bir fark vardı (X2(2) = 8,569, p = 0,014), öyle ki korku hatırlama grubu dondu önemli ölçüde .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (сред) няя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). iyi yok oluş grubundan daha büyük (ortalama sıra farkı = 10,57, p = 0,017) ancak kötü yok oluş grubunda değil (ortalama sıra farkı = −3,714, p > 0,999) (Şekil 2D).X2 (2) = 8,569，p = 0,014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组组 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с хим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014 ), ancak bu durumda, güvenlik önlemlerinin alınmasına izin verilir. , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разн) ица рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Test süresi boyunca, iyi tükenme grubu, zayıf tükenme grubu ve korkuyu hatırlama grubu arasında başlangıçtaki donma süresi açısından anlamlı bir fark vardı (X2(2) = 8,569, p = 0,014), dolayısıyla korkuyu hatırlama grup, yok oluşun iyi olduğu gruptan önemli ölçüde daha sık donar (ortalama sıra farkı = 10,57, p = 0,017), ancak yok oluşun zayıf olduğu gruptan (ortalama sıra farkı = -3,714, p > 0,999) (Şekil 2D).İyi sönme grubu, zayıf sönme grubu ve korku hatırlama grubu da test oturumunun ton sunumu sırasında önemli ölçüde farklı sönme sürelerine sahipti (X2(2) = 14,93, p = 0,001), dolayısıyla iyi sönme grubu önemli ölçüde daha az zaman.donma süresi, zayıf yok olma grubuna (ortalama sıra farkı = 9,286, p = 0,044) ve korku hafıza grubuna (ortalama sıra farkı = 13,86, p = 0,001) göre daha fazladır (Şekil 2D).
Yok oluşun hatırlanmasında bireysel farklılıklar.(A) Cerrahi ve davranışsal prosedürlerin ana hatları.(B) Kaybolan hafıza puanlarındaki bireysel farklılıkları gösteren frekans dağılımı.(C) Hesaplanan yok oluş hatırlama puanlarına göre tasarlanan grupların iki farklı fenotipi temsil ettiğine dair kanıt.(D) Koşullu bir korku refleks seansının 30 saniyelik hücrelerinde, 20, 30 s tonlarında, yok olma öğrenme oturumu sırasında 5 bloğa çöken farelerin kötü yok olma, iyi yok olma ve korku hatırlama için donma zamanının ortalama yüzdesi (4 ton) .her biri) ve solan anıların ve korku anılarının seanslarında dört tonda.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001。 *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
IL'ye retrograd bir gösterge enjekte edildi (Şekil 3A) ve ilgilenilen bölgenin ön-arka ekseni boyunca GFP+ hücrelerinin sayısı belirlendi (Şekil 3B-F).Anterior, orta ve posterior PVT arasında GFP+ hücre sayısında önemli bir fark vardı (X2(2) = 8,200, p = 0,017), dolayısıyla mPVT, aPVT'den (ortalama sıra) Diff'e göre önemli ölçüde daha fazla GFP+ hücre gösterdi.= 18,37, p = 0,035) ve pPVT (ortalama sıra farkı = 17,71, p = 0,045) (Şekil 3C).Her ne kadar birçok hayvan pCLA'da herhangi bir GFP+ hücresi tespit etmemiş ve bu nedenle bu bölgedeki aktiviteyi haritalandıramamış olsa da ön, orta ve arka CLA arasında anlamlı bir fark yoktu (X2(2) = 5,596, p = 0,061).GFP+ hücrelerinin sayısı (Şekil 3D).Daha sonra, birkaç sıçanda aBLA veya avHPC'de bazı GFP+ hücreleri bulunduğundan, bu alanların yalnızca ortası ve arkası analiz edildi.Orta ve arka BLA (U=393, p=0,009) GFP+ hücre sayısında anlamlı farklılık gösterdi, bu nedenle pBLA, mBLA'dan daha fazla IL projeksiyonu gösterdi (Şekil 3E).Benzer şekilde orta ve arka vHPC'ler arasında önemli bir fark vardı, bu nedenle pvHPC'ler mvHPC'lerden daha fazla IL projeksiyonu gösterdi (U = 403,5, p = 0,014) (Şekil 3F).Şekil 3G, Fos, aavRG-GFP ve çift etiketli hücreleri gösteren örnek bir görüntüdür.
İlgi konusu tüm beyin bölgesinde IL afferentlerini ölçün.(A) aavRG-CAG-GFP'nin tüm sıçan IL'sindeki dağılımının şematik gösterimi.(B) İlgi konusu beyin bölgesindeki farklı ön-arka konumlardaki retrograd belirteçlerin temsili görüntüleri.Ön-arka eksen (C) paraventriküler talamus, (D) klavikula, (E) bazolateral bademcik ve (F) ventral hipokampus boyunca retrograd etiketlemenin ölçülmesi.(G) aPVT'de retrograd aavRG etiketlemesini, Fos etiketlemesini ve çift aavRG ve Fos etiketlemesini gösteren temsili görüntüler.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01。 *p < 0,05，**p < 0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Ölçek çubuğu 100 µm.Panel A'daki kamuya açık beyin haritası, Swanson (2004) Beyin Haritası: Fare Beyin Yapısı, 3. Baskı'dan kopyalanmıştır ve Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 Uluslararası Lisansı (https://creativecommons.org/licenses/by-nc) kapsamında lisanslanmıştır. )./4.0/) https://larrywswanson.com adresinden indirilebilir.
Global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi, tüm sıçanlarda aPVT, mPVT ve pPVT'de analiz edildi.aPVT'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (Şekil 4A) ve Fos arasında anlamlı bir korelasyon da yoktu. aPVT'de ifade ve yok olma hatırlaması arasında (rs = 0,092, p = 0,691) (Şekil 4B) veya aPVT IL afferentlerinde Fos ifadesi ve yok olma hatırlaması arasında (rs = 0,143, p = 0,537) (Şekil 4D).Bununla birlikte, aPVT IL afferentlerinde Fos ekspresyonu, iyi tükenme, zayıf tükenme, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında önemli ölçüde farklılık gösterdi (X2(3) = 15.05, p = 0.002), dolayısıyla korku hatırlama grubu nispeten iyi bir tükenme gösterdi.regresyon (ortalama sıra farkı = 11,54, p = 0,003), zayıf regresyon (ortalama sıra farkı = 10,57, p = 0,034) ve ev hücresi (ortalama sıra farkı = 12,79, p = 0,005) grupları (Şekil 4C).Ayrıca mPVT'de Fos ifadesi (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (Şekil 4E) ve mPVT'de Fos ifadesi için iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu..Yok olma hatırlama ile önemli korelasyon (rs = 0,168 p = 0,468) (Şekil 4F).IL afferent mPVT hücrelerinde Fos ekspresyonunda iyi, kötü, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark olmasına rağmen (X2(3) = 9,252, p = 0,026), post hoc karşılaştırma herhangi bir veya ikisini ortaya çıkarmadı.Gruplar arasında önemli farklılıklar (Şekil 4G).Ayrıca, IL-afferent mPVT hücrelerinde Fos ekspresyonu ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu (rs = 0,174, p = 0,450) (Şekil 4H). Daha sonra, pPVT'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 13.89, p = 0.003), öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra) Fark = 14,96, p = 0,010), ancak zayıf yok oluş (Ortalama Sıra Farkı = 12,86, p = 0,113) veya korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 2,571, p > 0,999) değil, daha fazla Fos ifadesi sergiledi. ev kafesi grubu (Şekil 4I). Daha sonra, pPVT'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 13.89, p = 0.003), öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra) Fark = 14,96, p = 0,010), ancak zayıf yok oluş (Ortalama Sıra Farkı = 12,86, p = 0,113) veya korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 2,571, p > 0,999) değil, daha fazla Fos ifadesi sergiledi. ev kafesi grubu (Şekil 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха ve домашней клеткой в ​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг) Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) veya группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Ayrıca, pPVT'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3)=13.89, p=0.003), böylece iyi yok olma grubu (ortalama sıra Diff. = 14,96, p = 0,010), ancak zayıf yok oluş grubunda (ortalama sıra farkı = 12,86, p = 0,113) veya korku hafızası grubunda (ortalama sıra farkı = 2,571, p > 0,999) değil, Fos ifadesinin daha belirgin olduğunu gösterdi. ev hücre grubu (Şekil 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 ， p = 0.003） 使得 消组 （(ortalama Sıra Farkı.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Ortalama Sıra Farkı = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(Ortalama Sıra Farkı = 2,571, p > 0,999)，比家庭笼组（图4I ）。= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Ortalama Sıra Farkı = 12,86, p = 0,113) ）。İkincisi, iyi, kötü, korku hatırlama ve evdeki hücre grupları arasında pPVT'de Fos ifadesinde önemli farklılıklar vardı (X2(3) = 13.89, p = 0.003), bu da iyi alım grubunu oluşturuyor (ortalama sıra farkı = 14.96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) veya группе отзыва страха (средняя разница) нгов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), ancak yok olma (ortalama sıra farkı = 12,86, p = 0,113) veya korku hatırlama grubunda (ortalama sıra farkı = 2,571, p > 0,999) ev hücre grubundan daha kötü değildir (Şekil 4I)..Ancak pPVT Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu (rs = 0,051, p = 0,825) (Şekil 4J).Son olarak, iyi tükenme, zayıf tükenme, korku anıları ve ev hücrelerindeki gruplar arasında pPVT IL afferentlerinde Fos ekspresyonunda anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 12.34 p = 0.006), yani IL-'de iyi Fos ekspresyonu vardı yok olma gruplarından (ortalama sıra farkı = 12,54, p = 0,014) ve ev hücresinde (ortalama sıra farkı = 12,89, p = 0,049) (Şekil 4K) olduğundan daha kötüdür ve pPVT içindeki IL afferentleri ile önemli ölçüde ilişkilidir. Aktivasyon ve arasında yok oluşun iptali, daha iyi yok olma hatırlaması, bu IL afferentlerinin daha fazla aktivasyonuyla ilişkilendirildi (rs = -0,438, p = 0,047) (Şekil 4L).
Sıçanlarda posterior paraventriküler talamusun (PVT) IL afferentlerinde fos aktivitesi arttı ve bu da iyi bir gerileme gösterdi.(A) aPVT'de Fos ifadesinde gruplar arasında anlamlı bir fark yoktu.(B) aPVT'de Fos ifadesi ile yok oluşun geri çağrılması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(C) Korku hatırlama grubu, diğer tüm gruplarla karşılaştırıldığında IL afferentlerinde Fos ifadesinin arttığını gösterdi.(D) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile aPVT'deki yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(E) mPVT'de Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı bir fark yoktu.(F) mPVT'de Fos ifadesi ile yok olma belleği arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) mPVT'de afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi.(H) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile mPVT'deki yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(I) Soyu tükenmiş bir grup, ancak başka hiçbir grup, evde kafes grubuyla karşılaştırıldığında pPVT'de artan Fos aktivitesi göstermedi.(J) pPVT'de Fos ifadesi ile yok oluşun geri çağrılması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(K) İyi yok olma grubu, zayıf yok olma grubu ve ev hücre grubuyla karşılaştırıldığında IL afferent hücrelerinde artan Fos ekspresyonu gösterdi.(L) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile yok oluşun geri çağrılması arasında önemli bir korelasyon vardır, dolayısıyla iyi bir yok olma hatırlaması, IL afferentlerinde daha fazla Fos ifadesi ile ilişkilidir.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05，**p < 0,01。 *p < 0,05，**p < 0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Daha sonra sıçanların aCLA ve mCLA'sındaki global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi tüm gruplarda analiz edildi. aCLA'daki Fos ifadesinde iyi tükenme, zayıf tükenme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), öyle ki korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 14.50, p = 0.049), ancak ne zayıf (Ortalama Sıra Farkı = 10.21, p = 0.373) ne de iyi nesli tükenen (Ortalama Sıra Farkı = 4.607, p > 0.999) gruplar, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi sergilemedi ( Şekil 5A). aCLA'daki Fos ifadesinde iyi tükenme, zayıf tükenme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 8.455, p = 0.036), öyle ki korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 14.50, p = 0.049), ancak ne zayıf (Ortalama Sıra Farkı = 10.21, p = 0.373) ne de iyi nesli tükenen (Ortalama Sıra Farkı = 4.607, p > 0.999) gruplar, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi sergilemedi ( Şekil 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась чительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие) = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4) ,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис .5А). İyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücreleri grupları arasında aCLA Fos ifadesinde anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 8,455, p = 0,036), böylece korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14,50, p) = 0,049), fakat ne zayıf (ortalama sıra farkı = 10,21, p = 0,373) ne de iyi yok oluş grubu (ortalama sıra farkı = 4,607, p > 0,999) ev hücre grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8,455, p = 0,036),因此恐惧回忆组(Ortalama Sıra Farkı = 14.50，p = 0,049），但无论是差（平均秩差= 10,21，p = 0,373）还是良好灭绝（平均秩差= 4,607，p > 0,999）组，都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (ortalama Sıra Farkı = 14.50 ， P = P = P = P = P = 14. 0.049， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4.607 , p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха ve домашней кл еткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50), p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) ve с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). aCLA Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 8,455, p = 0,036), yani korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14,50), p = 0,049 ), ancak zayıf (ortalama sıra farkı = 10.21, p = 0.373) ve iyi tükenmeye (ortalama sıra farkı = 4.607, p> 0.999) sahip gruplar, ev hücre grubundan daha yüksek Fos ifadesi gösterdi (Şekil 5A). .(RS = 0,036, p = 0,876) (Şekil 5B)'deki küresel Fos ifadesi veya IL aCLA afferent hücrelerinde (rs = -0,282, p = 0,215) Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması (Şekil 5B) arasında anlamlı bir korelasyon yoktu..5D), aCLA IL afferentlerindeki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında da anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (Şekil 5C)..). Daha sonra, mCLA'daki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 10.12, p = 0.018), öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra Farkı) = 12,93, p = 0,038), ancak ne zayıf yok oluş (Ortalama Sıra Farkı = 5,143, p > 0,999) ne de korku hatırlama grupları (Ortalama Sıra Farkı = 14,00, p = 0,063) mCLA'da önemli ölçüde daha fazla Fos ifadesi göstermedi. ev kafesi grubuna göre (Şekil 5E). Daha sonra, mCLA'daki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 10.12, p = 0.018), öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra Farkı) = 12,93, p = 0,038), ancak ne zayıf yok oluş (Ortalama Sıra Farkı = 5,143, p > 0,999) ne de korku hatırlama grupları (Ortalama Sıra Farkı = 14,00, p = 0,063) mCLA'da önemli ölçüde daha fazla Fos ifadesi göstermedi. ev kafesi grubuna göre (Şekil 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями страхе ve домашней клеткой в ​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняяяя) ца рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва стра. ха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей mCLA'da Fos'un özellikleri. Daha sonra mCLA Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku anıları ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 10.12, p = 0.018), böylece iyi yok olma grubu (ortalama fark sıralaması = 12.93, p) = 0,038), ancak ne zayıf yok olma grupları (ortalama sıra farkı = 5,143, p > 0,999) ne de korku hatırlama grupları (ortalama sıra farkı = 14,00, p = 0,063) mCLA'da önemli ölçüde daha yüksek Fos ifadesi göstermedi.ev kafesi grubuyla karşılaştırıldığında (Şekil 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间显着 差异 （x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Ortalama Sıra Farkı .= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆组（平均秩差= 14,00 ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组(图5E)。 = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 回忆组 （平均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разность рангов = 5,143, p > 0,999), ни гру ппа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Ayrıca, iyi yok olma grubu, zayıf yok olma grubu, korku geribildirimi grubu ve ev hücre grubu arasında mCLA'da Fos ifadesinde anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 10,12, p = 0,018), dolayısıyla iyi yok olma grubu tükenme (ortalama sıra farkı = 12,93, p = 0,038), ancak mCLA'da ne zayıf tükenme (ortalama sıra farkı = 5,143, p > 0,999) ne de korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14,00, p = 0,999) = 0,063) daha iyi performans göstermedi Ev hücre grubuna kıyasla Multi Fos ifadesi (Şekil 5E).Bununla birlikte, mCLA'da (rs = 0,321, p = 0,156) (Şekil 5F) veya afferent IL mCLA hücrelerinde (rs = -0,121, p = 0,602) ve yok olma hatırlamasında (Şekil 5H) küresel Fos ekspresyonu, arasında anlamlı bir fark yoktur. iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve IL mCLA afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu için bir ev hücresi olan gruplar (X2(3)=4,923, p=0,178) (Şekil 5G).
Yok olma hafızası iyi olan sıçanlarda klostrumun ortasında Fos aktivitesi yükselmişti.(A) Korku hatırlama grubu, ancak diğer gruplar değil, aCLA'daki ev hücre grubuna kıyasla artan Fos aktivitesi gösterdi.(B) aCLA'daki Fos ifadesi ile yok oluşun hatırlanması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(C) IL aferent aCLA hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi.(D) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile aCLA'daki yok oluşun hatırlanması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(E) Soyu tükenmiş grup, ev hücre grubuna kıyasla mCLA'da artan Fos aktivitesi gösterdi, ancak diğer gruplar göstermedi.(F) mCLA'da Fos ifadesi ile yok oluşun geri çağrılması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) IL mCLA afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi.(H) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile mCLA'daki yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *р < 0,05. *p < 0,05.
Daha sonra mBLA ve pBLA'da global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi tüm sıçan gruplarında analiz edildi.mBLA'da Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu (X2(3)=0,944, p=0,815) (Şekil 6A).IL mBLA afferent hücrelerinde iyi regresyon, zayıf regresyon, korku hatırlama ve ev hücresi Fos ekspresyonu olan gruplar arasında da anlamlı bir fark yoktu (X2(3)=0,518, p=0,915) (Şekil 6C).Ek olarak mBLA'daki global Fos ekspresyonu (rs = 0,126, p = 0,588) (Şekil 6B) ile IL mBLA afferent hücrelerindeki Fos ekspresyonu (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p) arasında anlamlı bir korelasyon yoktu. = 0,385).p = 0,385).Şekil 6D) ve yok oluşun geri çağrılması.Ayrıca pBLA'daki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hafızası ve ev hücre gruplarında anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (Şekil 6E) ve ayrıca anlamlı bir fark yoktu. pBLA'da İyi.IL afferent hücrelerinde Fos ifadesinde yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları (X2(3)=1,954, p=0,582) (Şekil 6G).Son olarak, pBLA'da global Fos ifadesi (rs = 0,070, p = 0,762) (Şekil 6F) ve pBLA IL afferent hücrelerinde Fos ifadesi (rs = 0,122, p = 0,597) ve yok olma hatırlaması (Şekil 6H).
Nesli tükenme üremesindeki bireysel farklılıklar, bazolateral amigdaladaki Fos ifadesindeki farklılıklarla eşleştirilmedi.(A) mBLA'da Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı bir fark yoktu.(B) mBLA'da Fos ifadesi ile yok oluşun hatırlanması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(C) IL mBLA afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi.(D) IL afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu ile mBLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(E) pBLA'da Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı bir farklılık yoktu.(F) pBLA'da Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(G) Afferent IL pBLA hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(H) IL afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu ile pBLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder.
Son olarak, global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi, tüm sıçanlarda mvHPC ve pvHPC'de analiz edildi. MvHPC'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 8.056, p = 0.045), öyle ki iyi yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 13.29) , p = 0.031), ancak ne zayıf yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 6.857, p> 0.999) ne de korku hatırlama (Ortalama Sıra Farkı = 8.000, p = 0.864) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil 1). 7A). MvHPC'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2 (3) = 8.056, p = 0.045), öyle ki iyi yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 13.29) , p = 0.031), ancak ne zayıf yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 6.857, p> 0.999) ne de korku hatırlama (Ortalama Sıra Farkı = 8.000, p = 0.864) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil 1). 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась льная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29), p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средн) яя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). İyi tükenme, zayıf tükenme, korku hatırlama ve ev hücreleri (X2(3) = 8,056, p = 0,045), yani iyi tükenme (ortalama sıra farkı = 13,29), p = olan gruplar arasında mvHPC Fos ifadesinde anlamlı bir fark vardı. 0,031), ancak ne zayıf yok olma grubunda (ortalama sıra farkı = 6,857, p > 0,999) ne de korku hatırlama grubunda (ortalama sıra farkı = 8,000, p = 0,864) Fos ifadesi ev grubuna göre daha yüksek değildi.hücre (Şekil 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异（X2 (3) = 8,056, p = 0,0 45），因此良好消退（平均秩差= 13.29） ，p = 0.031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6.857，p > 0.999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8.000，p = 0.864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达(图2)。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8,0 56, p = 0,045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8.000 ， p = 0,864) ））））））））））））））））））））））））））））））））））） Имелась значительная разница между группами "хорошо", "плохо", "припоминание страха" ve "домашняя клетка" экспрес сии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) ve, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов =) 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) ve воспоминания о страхе (средняя ра) зница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). MvHPC'de Fos ifadesi için iyi, kötü, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 8,056, p = 0,045) ve bu nedenle iyi bir regresyon (ortalama sıra farkı = 13,29), p = 0,031), ancak nesli zayıf olan gruplar (ortalama sıra farkı = 6,857, p > 0,999) ve korku anıları (ortalama sıra farkı = 8,000, p = 0,864) ev kafesindeki gruba göre daha yüksek Fos ifadesi gösterdi (Şekil 2).7A).Ancak anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Şekil 7C).Ek olarak, mvHPC'deki global Fos ekspresyonu (rs = -0,233, p = 0,309) (Şekil 7B) ile mvHPC afferent IL hücrelerindeki Fos ekspresyonu (rs = 0,056, p = 0,810) (Şekil 7D) arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.ve kaybolmaya ilişkin bir rapor.Ayrıca, pvHPC'deki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (Şekil 7E) ve anlamlı bir fark yoktu.pvHPC afferent IL hücrelerinde Fos ifadesinin iyi gerilemesi, zayıf gerileme, korku hafızası ve ev hücre gruplarında fark (X2(3)=3,871, p=0,276) (Şekil 7G).Son olarak, pvHPC global Fos ifadesi (rs = −0,127, p = 0,584) (Şekil 7F) ile IL-afferent pvHPC hücrelerinde Fos ifadesi (rs = 0,176, p = 0,447) ve yok olma hatırlaması (Şekil 7F) arasında anlamlı bir korelasyon yoktu. ).7H).
Fos ekspresyonu, sıçanların ventral hipokampusunda yükselmiştir, bu da iyi hafızanın yok olduğunu gösterir.(A) Soyu tükenmiş grup, diğer gruplar değil, mvHPC'de ev hücre grubuna kıyasla artan Fos ekspresyonu gösterdi.(B) mvPHC'de Fos ifadesi ile yok oluşun geri çağrılması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(C) mvHPC afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(D) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile mvHPC'deki yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.(E) pvHPC'de Fos ifadesinde gruplar arasında anlamlı bir fark yoktu.(F) pvHPC'de Fos ifadesi ile yok oluşun geri çağrılması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) pVHPC afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu gruplar arasında anlamlı farklılık göstermedi.(H) IL afferentlerindeki Fos ekspresyonu ile pvHPC'deki yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir korelasyon yoktu.Hata çubukları ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *р < 0,05. *p < 0,05.Tüm bölgeler için birincil analizimiz, ön-arka eksen boyunca üç seviyede karşılaştırma gösterdi, ancak aynı zamanda ön-arka eksen boyunca çöken her bölgeyi de analiz ettik.Bu analizlerin sonuçları tablo 1'de sunulmaktadır.
Burada, yok oluşun hatırlanmasındaki bireysel farklılıkların, alt limbik korteksteki farklı afferent aktivite modellerine yansıtılıp yansıtılmayacağını test ettik.Bu amaçla, yok olma tekrarından sonra paraventriküler talamus, klostrum, bazolateral bademcik ve ventral hipokampustan gelen IL projeksiyonlarındaki Fos aktivitesini değerlendirdik.IL-projekte eden hücrelerde, nesli tükenmenin zayıf olduğu farelere kıyasla iyi tükenme hatırlaması sergileyen farelerde PVT'nin arka bölgesinde daha yüksek aktivite bulduk.Klaviküler çekirdek, ventral hipokampus veya bazolateral bademciklerden gelen IL aferentlerinde hiçbir fark yoktu.IL yansıtan hücrelere ek olarak, sıçan klostrumu ve ventral hipokampusunun seçilmiş alanlarında iyi çözünürlükte artan nöral aktivite gözlendi.Sonuçlarımız, başarılı yok olma hafızasının, klostrum ve ventral hipokampustaki IL ve IL olmayan hedefleme hücrelerine spesifik PVT projeksiyonları tarafından organize edildiğini göstermektedir.
PVT IL tahmininin, yok olma hatırlamasının iyi olduğu farelerde aktif olduğunu bulduk; bu, yok olma hatırlama için PVT'nin gerekli olduğunu gösteren yakın tarihli bir çalışmayla tutarlıdır.Bu çalışma, alt bölgeye özgü manipülasyonlar kullanmadı, ancak hem lateral merkezi amigdaladaki PVT projeksiyonlarının hem de PVT üzerindeki IL projeksiyonlarının yok oluşu yeniden oluşturmak için gerekli olduğunu gösterdi.Sonuçlarımız, IL-PVT-CeL zincirine ek olarak, söndürme geri çağırma için IL'ye PVT sonrası bir girişin de gerekli olabileceğini göstermektedir.Böylece, yok oluşun yeniden üretilmesinde hem efferent hem de afferent IL bağlantılarının rol oynadığı ortaya çıktı.Bir sonraki önemli adım, pPVT'nin nöral devre seviyesinde yok olma üremesine işaret etmesine neyin sebep olduğunu belirlemektir.IL ile olan ilişkiye ek olarak, önceki kanal izleme çalışmaları31,32 pPVT'nin, yok olma öğrenimi33,34,35,36 ile ilişkili olan ventral periakuaduktal griden (vPAG) girdi aldığını göstermiştir.Her ne kadar vPAG'in yok olma hatırlamasındaki rolü belirlenmemiş olsa da, vPAG tarafından pPVT'nin tahmini, yoğunlukları ve her iki bölgenin de korkunun yok oluşuna dair önceki kanıtların oluşturulmasında yer alması nedeniyle ilgi çekici bir adaydır.
PVT sonuçlarımızın bir diğer önemli yönü de ön-arka eksenleri boyunca uzmanlaşmış olmalarıdır.Çarpıcı bir şekilde, IL'deki PVT projeksiyonunun nöronal aktivitesi, zıt davranış durumuyla ilişkilidir; öyle ki, IL'deki PVT öncesi projeksiyon aktivitesi, korku hatırlama ile ilişkilendirilirken, pPVT projeksiyonu, başarılı hatırlama sönmesinden (yani korku) sonra aktiftir.PVT içindeki bu işlevsel heterojenlik, daha önceki çalışmalar göz önüne alındığında şaşırtıcı değildir [37'de tartışılmıştır].PVT'deki spesifik hücre tiplerinin özelliklerini karakterize eden bir çalışmada yakın zamanda PVT'deki fonksiyonel dağılımın çarpıcı bir örneği ortaya çıkmıştır.Bu çalışma, DRD2 eksprese eden dopamin hücrelerinin ağırlıklı olarak pPVT'de eksprese edildiğini, ön ayak korteksini innerve ettiğini ve önleyici uyaranlara yanıt verdiğini göstermektedir.İkinci hücre popülasyonu ağırlıklı olarak aPVT'de ifade edilir ve düşük fizyolojik uyarılma durumuna geçişi işaret eder ve alt ekstremite korteksini innerve eder.IL yansıtan aPVT hücreleri korku hatırlama sırasında aktif olduğundan, pPVT projeksiyonları aktif olduğundan ve hayvanlar düşük düzeyde korku gösterdiğinden, sonuçlarımız bu kalıba pek uymuyor.Görünen tutarsızlığın en az iki olası açıklaması vardır.İlk olarak, tanımlanan hücre tipleri yalnızca TVV'nin tek bir ön-arka bölgesinde bulunmaz.Bu nedenle, yok olma hafızası iyi olan sıçanlarda aktif IL yansıtan pPVT hücreleri, aPVT'de tespit edilme olasılığı daha yüksek olan ve düşük uyarılma durumuna geçiş sinyali veren bir hücre sınıfına ait olabilir.Aynı durum, korku anısından sonra etkinleştirilen aPVT'deki IL yansıtan hücreler için de geçerli olabilir.İkincisi, önceki izleme çalışmaları, IL3'ü yansıtan pPVT'lerin varlığını tanımlamıştır, ancak bazıları DRD2 içeren hücrelerden türetilmiş gibi görünse de, diğer hücre tipleri, IL'ye yansıtabilir ve söndürmenin başarılı bir şekilde yeniden üretilmesi üzerine aktive edilebilir.
Bu çalışmanın amacı, farklı yok olma fenotipleri sergileyen sıçanlar arasındaki farklılıkları belirlemek olsa da, bu deneyler aynı zamanda korku hafızası mekanizmalarıyla ilgili yeni verileri de ortaya çıkardı.İlginç bir şekilde, korku hafızası olan sıçanlarda ön CLA'da Fos aktivitesinin arttığını bulduk.
Klavikula kortikal iletişimin merkezi olarak konumlandırılmıştır ve duyusal entegrasyondan dikkat ve uykuya kadar uzanan süreçlerde görev almaktadır40,41,42,43.Klostrumun korku koşullanması veya korku ifadesine nasıl dahil olduğuna dair sınırlı kanıt vardır, ancak daha önceki araştırmalar bağlamsal korku ifadesinin klostrumdaki Fos aktivitesinde rol oynadığını göstermiştir.Son zamanlarda, bağlamsal korku koşullandırması sırasında entorhinal kortekse atrezi projeksiyonlarının inhibisyonunun, korku ifadesine olan ihtiyaçları test edilmemiş olmasına rağmen, uzun süreli hafıza oluşumunu bozduğu rapor edilmiştir.Aynı çalışmada, tanıdık bir ortama maruz bırakılan farelere kıyasla hayvanlar yeni bir ortama maruz bırakıldığında Fos aktivasyonunun arttığı gözlemlendi.Bunu akılda tutarak, burada bildirdiğimiz CLA aktivasyonunun, geri çağırma korkusundan ziyade, test sırasında yeni kameraya maruz kalma nedeniyle olabileceği düşünülüyor.Korku ve durumsal işlemede kilitlerin işlevini daha doğru bir şekilde karakterize etmek için gelecekteki çalışmalarda hedefe yönelik kilit manipülasyonu kullanılmalıdır.
Önceki çalışmalar PVT'nin korku hafızası ifadesiyle ilişkili olduğunu göstermiş olsa da45,46,47 koşullandırmadan 48 saat sonra korkuyu hatırlayan sıçanlarda toplam Fos ifadesinde herhangi bir değişiklik gözlemlemedik.Bu fark, koşullandırmanın gerçekleştiği aynı bağlamda farklı ipuçlarından duyulan korkuyu test eden önceki çalışma da dahil olmak üzere çeşitli faktörlerle açıklanabilirken, bizim deneyimizde test yeni bir odada yapıldı.Ek olarak, önceki çalışmada 90 dakikalık bir zaman noktası kullanılırken, hayvanlarımıza testten 60 dakika sonra ötenazi uyguladık.Son olarak önceki çalışmalarda test hayvanların iştahla tepki verebileceği bir odada gerçekleştirilirken, bizim çalışmamızda sıçanlar iştah yanıtı olmadan test edildi.Bu, bir dereceye kadar koşullu engellemeye izin verirken, hayvanların ipuçlarından korkup korkmadıklarını test ederken yiyecek elde etme baskısını engellemelerine izin vermenin, önemli bir uyarıcı faktör olan motivasyonel çatışma (yani korkuya karşı ödül) yarattığına dair kanıtlar vardır.katılım PVT48, 49. .
Bazolateral amigdalanın korku yok oluşunun kazanılmasında rol oynadığı bilinmektedir50,51 ve IL'ye BLA projeksiyonlarının da bu süreçte yer aldığına dair kanıtlar vardır23.Ancak BLA ve bağlantılarının yok oluşun geri dönüşüne dahil olup olmadığı belli değil.Görüntüleme çalışmaları23,28 hayvanlarda solmuş anıları hatırlatan BLA aktivitesinin arttığını göstermiştir.Önceki çalışmamız, iyi ve kötü nesli tükenen fareler arasında BLA aktivasyonu açısından bir fark göstermese de, buradaki sonuçlarımız, nesli tükenmeyi hatırlamanın genellikle BLA'yı veya BLA IL'yi tahmin etmedeki aktivasyonu etkilemediğini göstermektedir.Bulgularımızla tutarlı olarak, devre manipülasyon çalışmaları BLA'ya IL girişlerinin yok olma öğrenimi için önemli olduğunu öne sürse de, yok olma hatırlama için gerekli değildir.Bununla birlikte, BLA'nın rolü tamamen göz ardı edilemez çünkü son kanıtlar, BLA'daki belirli hücre türlerinin yok oluşu yeniden üretmek için gerekli olduğunu göstermektedir.
Önceki lezyon, ilaç ve görüntüleme çalışmaları bu alanın korku ifadesinde ve/veya geri alma sonrasında korkunun yeniden konsolidasyonunda rol oynadığını gösterdiğinden, özellikle korku hatırlama BLA'da Fos aktivasyonuyla sonuçlanmadı54,55,56,57.Burada sunulan veriler amigdalanın bazal ve lateral alt çekirdeğini birleştiriyor ve önceki veriler, korku ifadesinin, lateral çekirdeğin dorsal tarafındaki Fos aktivitesini yönlendirdiğini gösteriyor.Temel ve yanal verileri ayrı ayrı analiz ettik ancak her iki durumda da bir fark yoktu (veriler gösterilmemiştir) ve burada sunduğumuz verilerde her iki alan da çöktü.Lateral amigdalanın alt bölgelerini analiz etmedik, dolayısıyla bu alandaki spesifik değişiklikler maskelenebilir.BLA'da Fos aktivitesinde değişiklik olmamasının bir başka olasılığı da, koşullanmaya kıyasla korku anılarının zamanlamasından kaynaklanmaktadır.Önceki bazı çalışmalar, BLA'nın korku ifadesine katkısının koşullandırmadan sonraki zamanla azaldığını, öyle ki ifadenin koşullandırmadan 24 saat sonra BLA'ya bağımlı olduğunu, ancak 7 günde bağımsız olduğunu göstermiştir (ref. 45 ancak bkz. 58).Eğitimden 48 saat sonra meydana geldi ve bu zaman noktasında Fos aktivitesinde değişiklik olmaması muhtemelen BLA'nın korku ifadesine katılımındaki zamana bağlı değişiklikleri yansıtıyor.
Son olarak, başarılı yok oluş hafızasının ventral hipokampus ile ilişkili olduğuna dair kanıtlar bulduk.Bu, arka bölgede aynı model görülmediğinden "orta seviye" vHPC'lerin karakteristiğidir.Önceki çalışmayla tutarlı olarak afferent vHPC IL'lerde Fos aktivasyonunda herhangi bir değişiklik bulamadık.CS'nin sönmenin meydana geldiği bağlam dışında meydana gelmesi durumunda korkunun gerçekleşmesi için vHPC28,60,61'in gerekli olduğuna ve bunun en azından kısmen vHPC'nin IL13'e girişine bağlı olduğuna dair önemli kanıtlar vardır.Bu önceki sonuçlara dayanarak, zayıf solmanın, vHPC'nin öngörülen artan IL aktivitesi ile ilişkili olmasını bekleriz.Bununla birlikte, IL ile yansıtılan retrograd etiketli vHPC'lerde veya vHPC'lerdeki etiketsiz hücrelerde Fos aktivitesinde bir fark olmadığı için durum böyle değildi.Bu durum, solma bağlamında solmayı hatırlayamamanın, yenilenme korkusundan farklı bir mekanizmayı tetikleyebileceğini düşündürmektedir.
Doğasında olan bazı tasarım ve analiz sınırlamalarına ve bunların sonuçlarımızı nasıl etkilediğine dikkat etmek önemlidir.İlk olarak, nesli tükenmeyi hatırlama puanlarına göre hayvanları üst ve alt üçte bire, fareleri ise "iyi" ve "kötü" olarak ayırdık.Bu, hayvanları dağılımın ortasından ayrı gruplara ayıran grup şemalarından veya ortancaya göre ayırma veya sıçanların üst ve alt üçte birinin karşılaştırılması gibi hayvanları dağılımın ortasından hariç tutan grup şemalarından kaçınmak için yapılır. .bu durumdan kaçınmak istiyoruz çünkü ortalama bölünme, modellemeye çalıştığımız insanın travmaya verdiği tepkilerin değişkenliğini yansıtmıyor.Buna ek olarak, sıçanların üst ve alt üçte birini karşılaştırmak benzer büyüklükteki grupları karşılaştırmamıza izin verirken, bu yaklaşım, dağılımın merkezindeki hayvanları göz ardı eder ve yaralanmaya verilen tepkilerdeki değişkenliği doğru şekilde yansıtmaz.Yöntemimiz, heterojen varyans ve eşit olmayan örneklem büyüklüklerine sahip grupları karşılaştırma sorunlarına sahip olsa da, taklit etmeye çalıştığımız şeyi alternatif yöntemlerden daha iyi yakalar.
Burada sunulan sonuçlar, yok oluşun hatırlanmasındaki bireysel farklılıkların, sinirsel devre aktivitesindeki farklılıklara nasıl yansıdığını daha iyi anlamamıza yardımcı oluyor.Bulgularımız, aşırı korku ve korku tepkilerini ortadan kaldıramama ile ilişkili olduğu bilinen travma sonrası stres bozukluğu ile ilgili olabilir.Yok olma hatırlamasındaki farklılıkların, IL'ye yansıtılan içsel ve dışsal sinirsel aktivitedeki farklılıklarla ilişkili olduğunu gösterdik.Bu farklılıklar ön-arka eksen boyunca farklı bölgelere dağıtıldı ve bu da beyin fonksiyonunun alt bölge düzeyinde değerlendirilmesinin önemini daha da vurguladı.Mevcut yöntemin dezavantajları arasında çalışmanın alaka düzeyi ve erkek kemirgenlere odaklanılması yer almaktadır.Gelecekteki araştırmalar, dişi kemirgenlerde neslinin tükenmesini öğrenmenin altında yatan nörobiyolojik mekanizmaları belirlemeli ve nedensel çıkarımlar yapmak için yöntemler kullanmalıdır.
Mevcut çalışmada kullanılan ve/veya analiz edilen veri kümeleri, makul talep üzerine ilgili yazarlardan temin edilebilir.
Pavlov IP Şartlandırma: serebral korteksin fizyolojik aktivitesi üzerine bir çalışma.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO ve Davis, M. Travma sonrası reaksiyonların tedavisinde öğrenme ilkelerinin uygulanması. Rothbaum, BO ve Davis, M. Travma sonrası reaksiyonların tedavisinde öğrenme ilkelerinin uygulanması.Rotbaum BO ve Davis M. Travma sonrası reaksiyonların tedavisine öğrenme ilkelerinin uygulanması.Rotbaum BO ve Davis M. Travma sonrası reaksiyonların tedavisinde öğrenme ilkelerinin uygulanması.düzenlemek.New York Koleji.Bilim.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz kalma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın standart. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz kalma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın standart.Rauch SA, Eftekhari A. ve Ruzek DI Maruz kalma terapisine ilişkin bir inceleme: travma sonrası stres bozukluğu için altın standart tedavi. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz kalma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın standart.Rauch, SA, Eftekhari, A. ve Ruzek, DI Maruz kalma terapisine ilişkin bir inceleme: travma sonrası stres bozukluğu için altın standart tedavi.J. Rehabilitasyon.rezervuar geliştirme 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Uzun pozlama terapisi: geçmiş, bugün ve gelecek.Kaygının Bastırılması 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Bay Millard ve ark.Travma sonrası stres bozukluğunda hafıza kaybının varoluşsal ve edinilmiş nedenleri: ikiz bir çalışmanın bulguları.J. Psikiyatrist.depolama tankı.42(7), 515-520 (2008).
Bay Millard ve ark.Travma sonrası stres bozukluğunda solan anıları hatırlayamamanın nörobiyolojik temeli.Biyoloji.Psikoloji.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkudaki bireysel farklılıklar: Korku reaktivitesini ve korku iyileşme fenotiplerini izole etmek. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkudaki bireysel farklılıklar: Korku reaktivitesini ve korku iyileşme fenotiplerini izole etmek.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ve LeDoux, JE Korkudaki bireysel farklılıklar: korku tepkisi ve korkunun yeniden canlanmasının ayırt edici fenotipleri. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkudaki bireysel farklılıklar: korku tepkisinin izolasyonu ve korku iyileşme tablosu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ve LeDoux, JE Korkudaki bireysel farklılıklar: korku tepkilerinin izolasyonu ve korku iyileşmesinin fenotipi.J. Travma.basınç 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasında bireyler arası değişimi öngörüyor. Russo, AS & Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasında bireyler arası değişimi öngörüyor.Russo, AS ve Parsons, RG Farelerdeki akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasındaki bireysel farklılıkları öngörüyor. Russo, AS & Parsons, RG Russo, AS ve Parsons, RGRusso, AS ve Parsons, RG Farelerdeki akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasındaki bireysel farklılıkları öngörüyor.Nörobiyoloji.çalışmak.Hafıza.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Korku yok oluşunun hatırlanmasındaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktifleşen protein kinazın fosforilasyonu ile ilişkilidir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Korku yok oluşunun hatırlanmasındaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktifleşen protein kinazın fosforilasyonu ile ilişkilidir.Russo, AS, Lee, J. ve Parsons, RG Korku hatırlama yok oluşundaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktifleşen protein kinaz fosforilasyonuyla ilişkilidir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Russo, AS, Lee, J. ve Parsons, RG Korkunun azalmasının hatırlanması, periferik fosforifikasyondaki bireysel farklılıklarla ilgilidir.Russo, AS, Lee, J. ve Parsons, RG Hatırlama sırasında korkunun yok olmasındaki bireysel farklılıklar, alt ekstremite korteksindeki mitojenle aktifleşen protein kinazların fosforilasyonuyla ilişkilidir.Psikofarmakoloji 236(7), 2039–2048 (2019).