Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz.Kullanmakta olduğunuz tarayıcı sürümü sınırlı CSS desteğine sahiptir.En iyi deneyim için güncellenmiş bir tarayıcı kullanmanızı (veya Internet Explorer'da Uyumluluk Modunu devre dışı bırakmanızı) öneririz.Bu arada, sürekli destek sağlamak için siteyi stiller ve JavaScript olmadan yapacağız.
Travma sonrası stres bozukluğu (TSSB), travma ile ilişkili ipuçlarına verilen korku tepkilerini etkisiz hale getirme yeteneğindeki bir bozulma ile karakterize edilir.İnsan ve hayvan çalışmaları, frontal korteksin belirli alanlarının, korkuyu bastırmanın başarısını belirleyen anahtar arabulucular olarak katılımındaki farklılıklara işaret ediyor, ancak bu alanların farklı tutulumunu belirleyen nöral devrelerin etkileşimi net değil.Yok olma hatırlamasındaki bireysel farklılıkların nöronal devre aktivitesindeki farklılıklara nasıl yansıdığını daha iyi anlamak için, sıçan sublimbik korteksinden (IL) projeksiyonları retrograd izleyicilerle etiketledik ve IL projeksiyon nöronlarının içindeki ve dışındaki nöronal projeksiyonları karşılaştırdık.Bu verileri, sıçanlarda silinen hafızanın korunma derecesine göre gruplandırarak analiz ettik.IL-çıkıntılı hücrelerde, arka paratalamustaki nöronların, iyi bir yok olma hatırlaması sergileyen sıçanlarda artan aktivite sergilediğini bulduk.IL-çıkıntılı hücrelere ek olarak, sıçan klostrumu ve ventral hipokampusun seçilmiş bölgelerinde iyi çözünürlükle artan Fos aktivitesi gözlendi.Sonuçlarımız, yok olma hatırlamasındaki farklılıkların, IL projeksiyonlarının içindeki ve dışındaki belirli nöral aktivite kalıplarıyla ilişkili olduğunu göstermektedir.
Korku koşullandırması, nötr bir uyaran, caydırıcı bir koşulsuz uyaranla (UCS) ilişkilendirildiğinde meydana gelir; öyle ki başlangıçta nötr olan uyaran, şimdi koşullu uyaran (CS), UCS'nin yokluğunda koşullu bir korku tepkisi (CR) ortaya çıkarır.Koşullu korkunun tersine çevrilmesi, UCS1'in yokluğunda CS'nin tekrarlanan sunumuna bağlı olarak CR'den CS'ye bir azalma ile yönlendirildi.Önceki araştırmalar, travma sonrası stres bozukluğunun (TSSB), koşullu korku tepkilerinin2 yok oluşunu hatırlayamama ile ilişkili olduğunu göstermiştir.Travma sonrası stres bozukluğunun tedavisi için bilişsel davranışçı terapinin mihenk taşı, öğrenilmiş korku tepkilerinin ortadan kaldırılmasına dayanan maruz bırakma terapisidir3,4.Bu nedenle, kemirgen neslinin tükenme korkusu ve altta yatan nöral mekanizmalardaki bireysel farklılıklar üzerine yapılan çalışmalar, travmaya ve travma sonrası stres bozukluğunun tedavisine insan tepkilerindeki farklılıkları aydınlatmaya yardımcı olabilir.Başarısız yok olma anılarını başarılı olanlardan ayıran nöral mekanizmaları belirlemedeki ilerlemeye rağmen, keşfedilecek çok şey var.
Kemirgen yok oluşu7,8,9,10hatırlamada önemli bireysel farklılıklar olduğu için kemirgen modelleri bu çalışmada yararlıdır.Popülasyon düzeyinde korku yok oluşunun nöral mekanizmalarını araştıran önceki çalışma, infralibik korteksin (IL) aktivasyonunun yok oluşun geri çağrılması için gerekli olduğunu göstermiştir (refs 11, 12, 13, ancak bkz. 14) ve bazı çalışmalar bir azalma bulmuştur. IL'deki kemirgen aktivitesi, korkulan kemirgenlere kıyasla yok olma hakkında zayıf hafıza sergiliyor.Bununla birlikte, IL'lerin, daha zayıf yok olma gösterenlere kıyasla kemirgenlerde korkunun ortadan kaldırılmasını kolaylaştırmaya farklı şekilde dahil olduğu mekanizmalar belirsizdir.
Bir olasılık, bireyler arasındaki korku yok etme hafızasındaki farklılıkların, spesifik afferent IL'lerin diferansiyel aktivasyonunun sonucu olmasıdır.Anatomik çalışmalar18 beynin çeşitli kortikal ve subkortikal bölgelerinin IL'ye yoğun projeksiyonlar gönderdiğini ve bunun da beynin birçok bölgesine efferent projeksiyonlar gönderdiğini göstermiştir.Nüfus düzeyindeki araştırmalar, amigdalaya yönelik IL projeksiyonlarının, korku yok olma20,21,22 elde etmek için önemli olduğunu ve bazolateral amigdaladan (BLA) gelen IL girişinin de yok olma öğrenimi ile ilişkili olduğunu göstermiştir.IL-merkezli devrelerin yok olma hatırlamasına katılımı hakkında daha az araştırma var, ancak son çalışmalar hem ventral hem de dorsal hipokampusun IL tahmininde yer aldığını gösteriyor.IL'nin talamusun yeniden birleşen çekirdeğine götüren projeksiyonları, görünüşe göre korku yok oluşunun anısına da katılıyor.
Bu önceki çalışmalar, yok olma hatırlamasında yer alan sinir devrelerinin etkileşiminin bir resmini çizmeye başlıyor, ancak IL merkezli sinir devrelerindeki aktivitenin, yok olma hatırlamasındaki bireysel farklılıkları etkileyip etkilemediğine dair çok az veri var.Burada, bireyler arasındaki korku yok olma hafızasındaki farklılıkların, belirli beyin bölgelerinde IL girdi aktivasyonundaki değişikliklerle ilişkili olup olmadığını belirlemeye çalıştık.Özellikle talamus (PVT), klavikula (CLA), BLA ve ventral hipokampusun (vHPC) paraventriküler çekirdeğindeki IL afferent hücrelerinin aktivasyonunu değerlendirdik.Bu beyin bölgeleri, hem IL'ye yoğun projeksiyonlar gönderdikleri için hem de korkunun yok olması 18 ifadesine dahil olabileceklerinden şüphelenmek için sebepler olduğu için seçildi.Örneğin, yakın tarihli bir araştırma, korku edinimi ve yeniden üretimiyle ilgili olduğu bilinen bir bölge olan PVT'nin yok olma yeniden üretimi için gerekli olduğunu gösterdi.Ek olarak, önceki çalışmalar, yok olma hafızasını ifade eden sıçanlarda bazal amigdala ve vHPC aktivitesinin arttığını göstermiştir.Son olarak, önceki çalışmaların hiçbirinin yok olmadaki rolünü değerlendirmediği göz önüne alındığında, klostrum analizi daha keşifseldir.Bununla birlikte, son çalışmalar bunun korkunun bağlamsal koşullanmasında rol oynadığını göstermektedir29.
Viral GFP-konjuge retrograd izleyiciler, davranış testinden önce farelerin IL'sine enjekte edildi ve IL afferentlerindeki Fos aktivitesi, yok olma tekrarı, korku hatırlaması sırasında ve davranış testine tabi tutulmayan farelerde ölçüldü.Sonuçlarımız, posterior paraventriküler talamustan IL'ye olan projeksiyonların, neslinin tükenmesini başarılı bir şekilde hatırlayan sıçanlarda artan aktivite gösterdiğini göstermektedir.IL tahminlerine ek olarak, iyi gerileyen sıçanlarda klavikula ve ventral hipokampusun belirli bölgelerinde nöral aktivite arttı.Sonuçlarımız, IL'ye yansıtılan içsel ve dışsal nöral aktivite kalıplarının, korku yok olma hafızasındaki bireysel farklılıklar ile ilişkili olduğunu göstermektedir.
Charles River Laboratories'den (Raleigh, NC) elde edilen elli dört yetişkin erkek Sprague-Dawley sıçanı (vardıklarında 300-325 g) denek olarak kullanıldı.Sıçanlar, yiyecek ve suya serbest erişimleri olacak şekilde, 12 saatlik bir aydınlık/karanlık döngüsünde (ışıklar sabah 7'de açık) çiftler halinde barındırıldı.Bu deneyler için iki sıçan grubu (n = 28 ve n = 26) kullanıldı.Ölüm, cerrahi hata, hedef bölgede GFP ekspresyonu eksikliği, zayıf doku kalitesi ve davranış sorunları (Yöntemlerde açıklanmıştır) dışlandıktan sonra, yok olma hatırlama grubu 21 fareyi ve korku hatırlama grubu 7 fareyi, ev kafeslerini içermiştir.grup 7 sıçandan oluşuyordu (son analize 35 sıçan dahil edildi).Tüm prosedürler, Stony Brook Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylandı ve ARRIVE Yönergelerine (https://arriveguidelines.org) ve Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımına İlişkin NIH Yönergelerine uygun olarak yapıldı.
Sıçanlar ameliyattan iki gün önce tedavi edildi.Sıçanlara ketamin (87 mg/kg) ve ksilazin (10 mg/kg) ile anestezi uygulandı, bir stereotaksik aparata (Stoelting, Woodale, İL) yerleştirildi ve IL'ye tek taraflı AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) enjeksiyonları yapıldı.(sol ve sağ enjeksiyonları dengeleyin).Enjeksiyon için 22 gauge kanül yerine indirildi (AP: + 3.00, ML: ± 0.6, DV: – 5.2).Dakikada 0,15 µl hızında 0,6 µl virüs iletmek için kılavuz kanüle bir 28G iç kanül (PE 20 tüpü yoluyla bir infüzyon pompasına bağlı) yerleştirin ve infüzyon bozulmadan sonra 5 dakika yerinde bırakın..Sıçanlara sütür atıldıktan sonra meloksikam (1 mg/kg) enjekte edildi ve hareket etmeye başlar başlamaz kafeslerine geri konuldu.Sıçanlar, virüsün geri kazanılmasına ve retrograd taşınmasına izin vermek için yaklaşık 7 hafta kafeslerinde tutuldu.Üç fare anestezi altında öldü ve 51 fare (%94) ameliyattan başarıyla çıktı.
Tüm prosedürler, 45,7 cm x 43,2 cm x 43,2 cm ses emici izolasyon kutularında (Clever Sys. . Inc.) bulunan 32 cm x 25 cm x 21 cm klima odalarında (Clever Systems Inc., Reston, VA) gerçekleştirildi.).Sönmeyi öğrenme ve sönüm hatırlama oturumları sırasında, bağlam, orijinal koşullu bağlamdan farklı olacak şekilde değiştirildi.Koşul A (korku üretimi) 28 voltluk akkor ampulleri, ev tipi ampulleri (Chicago Micro Lighting, BK) içerirken, B Koşulu (yok olma eğitimi, yok olmayı hatırlama testi ve korkuyu hatırlama testi) kızılötesi LED lambaları (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) içeriyordu. ., Çin;U48R).Ayrıca, Bağlam A'da paslanmaz çelik ve pleksiglas duvarlarla titreşim önleyici çıtalı bir zemin bulunurken, Bağlam B'de zemine ve duvarlara yerleştirilmiş boyalı metal ekler bulunur.Bağlam B şekli, standart bir şartlandırma bölmesine 33,5 cm x 21,3 cm'lik kavisli bir metal parça yerleştirilerek de değiştirildi.Ek olarak, A bağlamında hazneler %5 asetik asit ile silinirken, B bağlamında hazneler %5 amonyum hidroksit ile silinmiştir.Son olarak, bağlam B'de fareler, arabalardaki kafeslerde yuvarlanmak yerine test odasına kovalarla getirildi.Davranışsal oturumlar üst kamera ile kaydedildi ve her kameradan gelen video sinyali, piksel değişikliklerine dayalı olarak solma davranışını değerlendiren yazılıma (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) beslendi.Parametreler, bilgisayar tarafından tahmin edilen sönümleme davranışının eğitimli gözlemcilerin manuel olarak tahmin edilen davranışıyla yakından eşleşeceği şekilde seçilmiştir.30 saniyelik bir aralıkta toplanan donma süresinin yüzdesini gösteren bir değer.
Tüm davranış programları, aydınlık/karanlık döngüsünün aydınlık kısmı sırasında gerçekleştirilir.Sıçanlar, davranış prosedürlerinin başlamasından 5 gün önce tedavi edildi ve tedavinin son üç günü için davranış odasına nakledildi.Davranış testinin ilk gününde, bir grup nesli tükenme hatırlama faresi, korku koşullu bir reflekse yerleştirildi, ardından A bağlamına yerleştirildi, 6 dakikalık uyarılmamış bir iklimlendirme süresi verildi ve ardından her iki 4 kHz, 76 dB, 30 saniyelik kombinasyonlar verildi. .ton ve genel sonlandırma, 1,0 mA, tekme 1 sn (2 dk ITI).Tüm davranışsal eğitimler için sıçanlar, uyaranın son sunumundan 2 dakika sonra kafeslere geri döndü.Ertesi gün, nesli tükenme-hatırlama grubundaki fareler, bağlam odası B'ye yerleştirildi ve 6 dakikalık bir alışma döneminden sonra nesli tükenme eğitimi olarak 20 ses sunumu (2 dakika ITI) gerçekleştirdi.Ertesi gün, ekstinksiyon üreme grubundaki fareler, ekstinksiyon testi olarak 6 dakikalık alışma süresinden sonra B bağlamında 4 tona maruz bırakıldı.Tükenme hafızası grubundaki sıçanlara, davranışsal seanstan 60 dakika sonra perfüze edildi.Korku anılarını uyandıran bir grup kontrol faresi, A bağlamında korku koşullu tepkinin ilk gününde aynı prosedüre tabi tutuldu. Kırk sekiz saat sonra, fareler bağlam odası B'ye yerleştirildi ve 4 sesli sunuma tabi tutuldu (2- dakika ITI) bir hatırlama testi olarak.6 dakikalık alışma süresinden sonra korku.Davranış seansından 60 dakika sonra sıçanlara perfüzyon uygulandı.Bir grup evcil kontrol faresi, deney boyunca ev kafeslerinde kaldı ve deney fareleriyle aynı gün perfüze edildi.İki sıçan grubunun her biri iki seriye ayrıldı ve her gruptaki hayvan sayısı seriler arasında dengelendi.Korku anıları grubundaki bir sıçan, korku koşullandırma belirtileri göstermediği için (korku anıları testi sırasında zamanın %15'inden daha az donma) analizden çıkarıldı.Davranışsal zaman çizelgesinin bir diyagramı için Şekil 2A'ya bakın.
Sıçanlara Fatal Plus solüsyonu (100 mg/kg) ile aşırı doz verildi, ardından buz gibi %10 PBS ve ardından %10 tamponlu formalin ile perfüze edildi.Beyin çıkarıldı ve formalin içinde %30 sakaroz çözeltisi içinde 4°C'de yaklaşık 1 hafta süreyle saklandı.Daha sonra beyin donduruldu ve 40 um kalınlığında bir kriyostat halinde kesildi.Kesitler, 4°C'de %10 PBS içinde sırayla saklandı.Daha sonra, ilgilenilen beyin bölgesini içeren serbest yüzen bölümlerde immünofloresan yapıldı.Kesitler, her biri 5 dakika süreyle %10 PBS içerisinde 3 kez yıkandı.Kesitler daha sonra normal keçi serumunun %5'lik bloke edici solüsyonunda 2 saat süreyle oda sıcaklığında inkübe edildi ve ardından üç kez daha her biri 5 dakika süreyle %10 PBS içinde yıkandı.Kesitler daha sonra %10 PBS içinde %1 BSA ile seyreltilmiş birincil antikorlar (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) içinde 4°C'de gece boyunca inkübe edildi.Ertesi gün, kesitler %10 PBS içinde 30 dakika 4°C'de, ardından 3 kez 5 dakika %10 PBS içinde yıkandı ve ikincil bir antikorla (Alexa Fluor 594 keçi anti-tavşan, kırmızı konjugat, 1:500) inkübe edildi. ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) oda sıcaklığında 2 saat.5 dakika süreyle %10 PBS içinde 3 ilave yıkamadan sonra, kesitler cam lamlar üzerine yerleştirildi ve Fluoromount-G (Invitrogen) ile kapatıldı.Şekil 3G'de immün boyamanın temsili resimlerine bakın.
Bir Infinity3 dijital kamera (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) ve bir Zeiss mikroskobuna bağlı bir hafif motor (Lumencor, Beaverton, OR) kullanan bir flüoresan mikroskop, bölümler de dahil olmak üzere beynin ilgilenilen her bölgesinden görüntüler elde etmek için kullanıldı. İmmünofloresan içermeyen IL.enjeksiyon bölgesinin doğru yerleşimini doğrulamak için yapılır.Hücre sayımı için kullanılan görüntüler 20x büyütmede elde edildi.Her doku bölümü için, GFP'nin görselleştirilmesini sağlayan bir filtre ile bir görüntü ve ikincil antikordaki Alexa Fluor kırmızı konjugatının görselleştirilmesini sağlayan bir filtre ile bir görüntü alın ve görüntü için görüntüleme yazılımı (Infinity Analyze, sürüm 3) kullanıldı. kaplama.Aynı maruz kalma süresini kullanarak beynin tüm bölgelerinin tüm görüntülerini elde edin ve ayarları kazanın.Virüsün ana bulaşması IL dışında gerçekleştiği için altı fare analizden çıkarıldı (%88 isabet oranı).IL'ye saldıran virüse rağmen, ilgilenilen tüm hedef beyin bölgelerinde yeterli GFP ekspresyonu göstermedikleri için sekiz fare daha dışlandı.Ek olarak, zayıf doku kalitesi nedeniyle bir sıçan dışlandı.
Her görüntü için aynı prosedürü kullanarak J görüntüsündeki (NIH) arka plan gürültüsünü azaltmak için parlaklığı ve kontrastı ayarlayın.Toplam retrograd etiketli hücreler, toplam Fos etiketli hücreler ve toplam çift etiketli hücreler için hücre sayımları, Image J sitometre eklentisi kullanılarak hayvanları tanımlamayan deneyci tarafından manuel olarak yapıldı.Hücre sayıları hücre/mm2'ye normalize edildi.IL-çıkıntılı hücrelerde Fos ekspresyonunu analiz etmek için çift etiketli hücrelerin sayısı, retrograd etiketli hücrelerin toplam sayısına göre normalleştirildi.mBLA, mvHPC ve pvHPC analizi için birden çok 20x görüntüden alınan hücre sayıları toplandı ve hücre/mm2 olarak normalleştirildi.Beyin bölgelerinin geri kalanının analizi için 20x'lik bir görüntü veya 20x'lik görüntünün bir kısmı analiz edildi ve hücre/mm2'ye normalleştirildi.vHPC analizi CA1, CA2 ve subdominant vHPC bölgelerini içermiştir.Şekil 1, düzlemin ön-arka sınırını çizen görüntülerle analiz edilen beyin bölgelerini göstermektedir.
İlgili beyin bölgelerinin kısaltmaları ve yerleri.Makalede verilen beyin bölgelerinin kısaltmaları ve konumlarının açıklaması.Kamu malı beyin haritası Swanson'dan alınmıştır (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3rd Edition, Creative Commons Atıf-GayriTicari 4.0 Uluslararası Lisansı (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) altında lisanslanmıştır. ./), https://larrywswanson.com adresinden indirilebilir.
Donma süresi yüzdesi, ara aralıklar hariç, 30 saniyelik bir ton çalma süresi boyunca ortalaması alınır.Sönme hatırlama oranları, sönüm hatırlama sırasındaki solma süresinin yüzdesinin, ilk 4 sönüm eğitimi denemesi sırasındaki sönüm yüzdesi olarak ifade edilmesiyle hesaplanmıştır (dört sönüm hatırlama tonu sırasında sönümleme/ilk dört sönüm eğitim tonu sırasında sönümlenme*100).Düşük puanlar iyi sönümleme belleğini, yüksek puanlar ise zayıf sönümleme belleğini gösterir.Sıçanlar, yok olma hatırlama puanına göre sıralandı; yok olma hatırlama puanının ilk üçte birinde yer alan fareler "kötü yok olma fareleri" olarak sınıflandırıldı ve yok olma hatırlama puanının son üçte ikisinde yer alan fareler "iyi" olarak sınıflandırıldı.Bellek solma fareleri.
Parametrik olmayan testler kullanılır çünkü veriler genellikle varyansların normal dağılımı ve/veya homojenliği hakkındaki varsayımları ihlal eder.Spearman'ın sıra korelasyonu, nesli tükenme hatırlama testine tabi tutulan tüm sıçanlarda, nesli tükenme hatırlama puanları ile Fos işaretleri ve beyin ilgi alanlarındaki ikili işaretler arasında anlamlı bir ilişki olup olmadığını belirlemek için kullanıldı.İki bağımsız grup arasında fark olup olmadığını belirlemek için Mann-Whitney U testi kullanıldı.2 veya daha fazla grubun birbirinden farklı olup olmadığını belirlemek için Kruskal-Wallis testi, Kruskal-Wallis istatistiğinin anlamlı olduğu durumlarda Dunn çoklu karşılaştırma testi kullanılır.Tükenme öğrenimi sırasındaki solma, denekler arası faktör olarak grup ve denek içi faktör olarak test ile tekrarlanan ölçümler varyans analizi kullanılarak değerlendirildi. Sonuçlar, tüm istatistiksel testler için p < 0.05 olduğunda anlamlı kabul edildi. Sonuçlar, tüm istatistiksel testler için p < 0.05 olduğunda anlamlı kabul edildi. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Sonuçlar, tüm istatistiksel testler için p < 0.05'te anlamlı kabul edildi.当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Sonuçlar, tüm istatistiksel testler için p < 0.05'te anlamlı kabul edildi.
Şekil 2, deneysel zaman çizelgesini (Şekil 2A) ve nesli tükenmeye maruz kalan tüm farelerin frekans dağılımını (Şekil 2B) göstermektedir. İyi ve zayıf yok olma gruplarındaki sıçanlar, bu hesaplanan yok olma hatırlama puanlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0.001) (Şekil 2C). İyi ve zayıf yok olma gruplarındaki sıçanlar, bu hesaplanan yok olma hatırlama puanlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0.001) (Şekil 2C). Крысы грetim п с хошиçek п лохим уим р 2 2ались п рем залительно рapor, = п, 0, 0 numarın İyi ve kötü yok olma gruplarındaki sıçanlar, bu hesaplanan yok olma hatırlama oranlarında önemli ölçüde farklılık gösterdi (U=0, p<0.001) (Şekil 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异（U = 0，p <0.001）（。2C（。2C） U = 0，p <0.001）（2C， В этих рассчитанных показателях припоминания угашения крысы в ​​​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Bu hesaplanan yok olma hatırlama oranlarında, iyi ve kötü yok olma gruplarındaki fareler önemli ölçüde farklılık gösterdi (U = 0, p < 0,001) (Şekil 2C).Korku koşullu refleks seansının temel döneminde (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Şekil 2D) iyi sönme, zayıf yok olma ve korku hatırlama grupları arasında donma süresinde anlamlı bir fark yoktu.Ayrıca, korku koşullu refleksin ilk tonunun sunumu sırasında, iyi sönme, zayıf sönme ve korkuyu hatırlama grupları arasında donma süresi açısından anlamlı bir fark yoktu (X2(2) = 1.107, p = 0.575), şu şekilde: ikinci tonlarda korku sırasında olduğu gibi.Koşullandırma seansı sırasında, iyi tükenme, zayıf sönme ve korku hatırlama (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (Şekil 2D) olan gruplar arasında donma süresinde önemli bir fark vardı.Temel yok olma eğitim döneminde (U = 45.00, p = 0.799) (Şekil 2D) sırasında iyi ve zayıf yok olma grupları arasında solma süresinde önemli bir fark yoktu. Daha sonra, yok olma eğitimi oturumu sırasında (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001) donarak harcanan süre üzerinde deneme bloğunun (blok başına 5 ton) önemli bir ana etkisi vardı, bu da yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösterir (Şekil 2D). ). Daha sonra, yok olma eğitimi oturumu sırasında (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001) donarak harcanan süre üzerinde deneme bloğunun (blok başına 5 ton) önemli bir ana etkisi vardı, bu da yok olma öğreniminin gerçekleştiğini gösterir (Şekil 2D). ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис.2D). Daha sonra deneme bloğunun (blok başına 5 ton) yok olma eğitimi sırasında donma süresi üzerinde önemli bir ana etkisi vardı (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), bu da sönme öğreniminin gerçekleştiğini gösteriyor ( Şekil .2B). ).接下来 ， 在 消退 期间 期间 试块 每 块 音）） 冻结 时间 有 的 主 （（（（（发生 有）） （发生 发生 发生 发生 发生 了 了 消退 学习 （ .接下来 ， 在 消退 期间 期间 试块 每 块 音）） 冻结 时间 有 的 主 （（（（（发生 有）） （发生 发生 发生 发生 发生 了 了 消退 学习 （ . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис .2B). Daha sonra, sönme öğrenimi sırasında, deneme bloklarının (blok başına 5 ton) solma süresi üzerinde önemli bir ana etkisi oldu (F(2.884, 54.80) = 8.331, p < 0.001), bu da sönme öğreniminin gerçekleştiğini gösteriyor (Şekil .2D) .Bununla birlikte, sönme grubu (F(1, 19) = 3.091, p = 0.095), sönme eğitimi süresi boyunca solma süresi üzerinde önemli bir etkiye sahip değildi ve deneme bloğu ile sönme grubu (F(4) arasında herhangi bir etkileşim yoktu. , 19)) .76) = 1.890, p = 0.121) (Şekil 2D). Test oturumu sırasında, temel süre boyunca donarak geçirilen süre (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) açısından iyi sönme, zayıf sönme ve korku hatırlama grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki korku hatırlama grubu önemli ölçüde dondu iyi sönme grubundan daha fazla (Ortalama Sıralama Farkı = 10.57, p = 0.017), ancak zayıf sönme grubundan değil (Ortalama Sıralama Farkı = - 3.714, p > 0.999) (Şekil 2D). Test oturumu sırasında, temel süre boyunca donarak geçirilen süre (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) açısından iyi sönme, zayıf sönme ve korku hatırlama grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki korku hatırlama grubu önemli ölçüde dondu iyi sönme grubundan daha fazla (Ortalama Sıralama Farkı = 10.57, p = 0.017), ancak zayıf sönme grubundan değil (Ortalama Sıralama Farkı = - 3.714, p > 0.999) (Şekil 2D).Test oturumu sırasında, temel süre boyunca donarak geçirilen süre açısından iyi yok olma, zayıf yok olma ve korkuyu hatırlama grupları arasında önemli bir fark vardı (X2(2) = 8,569, p = 0,014), öyle ki korku hatırlama grubu dondu önemli ölçüde .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). iyi sönme grubundan daha büyük (ortalama sıra farkı = 10.57, p = 0.017) ancak kötü sönme grubunda değil (ortalama sıra farkı = -3.714, p > 0.999) (Şekil 2D).在 测试 期间 ， 消退组 消退组 消退组 回忆组 回忆组 在 基线期 基线期 冻结 存在 显着 （（（（（（（（（（（（（差异 差异 p = 0.014） ， 因此 恐惧 冻结 超过 超过 超过 超过 超过 超过 显着 超过 超过 超过 显着 显着 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结 冻结（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。在 测试 期间 良好 消退组 、 消退组 基线期 基线期 冻结 冻结 时间 方面 存在 差异 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（的 的 的 的 的 的 组 组 组 组 组 组 组 组 组 良好 良好 的 组 组 良好 良好 良好 良好 良好 良好 良好组 组 组（平均秩差= 10.57，p = 0.017），但不是差绝组（平均秩差= – 3.714，p > 0.999）（图2D）。 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Test süresi boyunca, başlangıçtaki donma süresi (X2(2) = 8,569, p = 0,014) açısından iyi sönme grubu, zayıf yok olma grubu ve korku hatırlama grubu arasında anlamlı bir fark vardı, bu nedenle korku hatırlama grup, iyi tükenme olan gruptan (ortalama sıra farkı = 10.57, p = 0.017) önemli ölçüde daha sık donar, ancak zayıf tükenme olan gruptan (ortalama sıra farkı = -3.714, p > 0.999) (Şekil 2D).İyi sönme grubu, zayıf sönme grubu ve korku hatırlama grubu da test oturumunun ton sunumu sırasında önemli ölçüde farklı solma sürelerine sahipti (X2(2) = 14,93, p = 0,001), bu nedenle iyi sönme grubu önemli ölçüde daha azdı zaman.donma süresi, zayıf sönme grubuna (ortalama sıra farkı = 9.286, p = 0.044) ve korku hafızası grubuna (ortalama sıra farkı = 13.86, p = 0.001) göre (Şekil 2D).
Yok oluşun hatırlanmasında bireysel farklılıklar.(A) Cerrahi ve davranışsal prosedürlerin ana hatları.(B) Kaybolan bellek puanlarındaki bireysel farklılıkları gösteren frekans dağılımı.(C) Hesaplanan yok olma hatırlama puanlarına göre tasarlanan grupların iki farklı fenotipi temsil ettiğine dair kanıt.(D) Koşullu bir korku refleksi seansının 30 saniyelik hücrelerinde kötü yok olma, iyi yok olma ve korku hatırlama için farelerin donma süresinin ortalama yüzdesi, 20, 30 s tonlarında, yok olma öğrenme oturumu sırasında 5 bloğa çöktü (4 ton) .her biri) ve solma anıları ve korku anıları seanslarında dört tonda.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。 *p < 0.05，**p < 0.01，***p < 0.001，****p < 0.0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
IL'ye retrograd bir gösterge enjekte edildi (Şekil 3A) ve ilgilenilen bölgenin ön-arka ekseni boyunca GFP+ hücrelerinin sayısı belirlendi (Şekil 3B-F).Anterior, orta ve posterior PVT (X2(2) = 8.200, p = 0.017) arasında GFP+ hücrelerinin sayısında önemli bir fark vardı, bu nedenle mPVT, aPVT (ortalama sıra) Farkından önemli ölçüde daha fazla GFP+ hücresi gösterdi.= 18.37, p = 0.035) ve pPVT (ortalama sıra Farkı = 17.71, p = 0.045) (Şekil 3C).Birkaç hayvan, pCLA'da herhangi bir GFP+ hücresi tespit etmemiş ve bu nedenle bu bölgedeki aktiviteyi haritalandıramasa da ön, orta ve arka CLA arasında anlamlı bir fark yoktu (X2(2) = 5.596, p = 0.061).GFP+ hücre sayısı (Şekil 3D).Daha sonra, birkaç farede aBLA veya avHPC'de bazı GFP+ hücreleri bulunduğundan, bu alanların yalnızca ortası ve arkası analiz edildi.Orta ve arka BLA (U=393, p=0.009), GFP+ hücrelerinin sayısında önemli ölçüde farklılık gösterdi, dolayısıyla pBLA, mBLA'dan daha fazla IL projeksiyonu gösterdi (Şekil 3E).Benzer şekilde, orta ve arka vHPC'ler arasında önemli bir fark vardı, bu nedenle pvHPC'ler mvHPC'lerden daha fazla IL projeksiyonu gösterdi (U = 403,5, p = 0,014) (Şekil 3F).Şekil 3G, Fos, aavRG-GFP ve çift etiketli hücreleri gösteren örnek bir görüntüdür.
Ilgi tüm beyin bölgesinde IL afferentleri ölçmek.(A) aavRG-CAG-GFP'nin tüm sıçan IL'sinde dağılımının şematik gösterimi.(B) İlgilenilen beyin bölgesindeki farklı anteroposterior konumlardaki retrograd belirteçlerin temsili görüntüleri.Ön-arka eksen (C) paraventriküler talamus, (D) klavikula, (E) bazolateral tonsil ve (F) ventral hipokampus boyunca retrograd etiketlemenin miktarının belirlenmesi.(G) aPVT'de retrograd aavRG etiketlemesini, Fos etiketlemesini ve çift aavRG ve Fos etiketlemesini gösteren temsili görüntüler.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0.05，**p < 0.01。 *p < 0.05，**p < 0.01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Ölçek çubuğu 100 µm.Panel A'daki kamu malı beyin haritası, Creative Commons Atıf-NonCommons 4.0 Uluslararası Lisansı (https://creativecommons.org/licenses/by-nc) altında lisanslanan Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition'dan alınmıştır. )./4.0/) https://larrywswanson.com adresinden indirilebilir.
Global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi, tüm sıçanlarda aPVT, mPVT ve pPVT'de analiz edildi.aPVT'de (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (Şekil 4A) Fos ifadesinde iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu ve Fos arasında anlamlı bir korelasyon yoktu. aPVT'de ifade ve yok olma hatırlaması arasında (rs = 0,092, p = 0,691) (Şekil 4B) veya aPVT IL aferentlerinde Fos ifadesi ve yok olma hatırlaması arasında (rs = 0,143, p = 0,537) (Şekil 4D).Bununla birlikte, aPVT IL afferentlerinde Fos ifadesi, iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında önemli ölçüde farklılık gösterdi (X2(3) = 15.05, p = 0.002), bu nedenle korku hatırlama grubu nispeten iyi bir yok olma gösterdi.regresyon (ortalama sıra farkı = 11.54, p = 0.003), zayıf regresyon (ortalama sıra farkı = 10.57, p = 0.034) ve ev hücresi (ortalama sıra farkı = 12.79, p = 0.005) grupları (Şekil 4C).Ayrıca, mPVT'de Fos ifadesi (X2(3) = 2.272, p = 0.518) (Şekil 4E) ve mPVT'de Fos ifadesi için iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu..Yok olma hatırlama ile önemli korelasyon (rs = 0,168 p = 0,468) (Şekil 4F).IL afferent mPVT hücrelerinde Fos ifadesinde iyi, kötü, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark olmasına rağmen (X2(3) = 9.252, p = 0.026), post hoc karşılaştırma herhangi birini veya ikisini ortaya çıkarmadı.Gruplar arasında önemli farklılıklar (Şekil 4G).Ayrıca, IL-afferent mPVT hücrelerinde Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu (rs = 0.174, p = 0.450) (Şekil 4H). Daha sonra, pPVT'deki Fos ifadesinde (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki iyi sönme grubu (Ortalama Sıralama) Fark = 14.96, p = 0.010), ancak zayıf ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 12.86, p = 0.113) veya korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 2.571, p > 0.999) değil, daha fazla Fos ifadesi gösterdi. ev kafesi grubu (Şekil 4I). Daha sonra, pPVT'deki Fos ifadesinde (X2 (3) = 13.89, p = 0.003) iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki iyi sönme grubu (Ortalama Sıralama) Fark = 14.96, p = 0.010), ancak zayıf ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 12.86, p = 0.113) veya korku hatırlama grubu (Ortalama Sıra Farkı = 2.571, p > 0.999) değil, daha fazla Fos ifadesi gösterdi. ev kafesi grubu (Şekil 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Ayrıca, pPVT'de Fos ifadesinde iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3)=13.89, p=0.003), böylece iyi sönme grubu (ortalama sıra Diff. = 14.96, p = 0.010), ancak zayıf sönme grubunda (ortalama sıra farkı = 12.86, p = 0.113) veya korku hafızası grubunda (ortalama sıra farkı = 2.571, p > 0.999) değil, daha belirgin Fos ifadesi gösterdi. ev hücre grubu (Şekil 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 差异 （（x2 （3） = 13.89 ， p = 0.003） 使得 消组 （（Ortalama rütbe.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Ortalama Sıra Farkı = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Ortalama Sıra Farkı = 2.571, p > 0.999) )= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Ortalama Sıra Farkı = 12.86, p = 0.113) ）。İkincisi, iyi, kötü, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında pPVT'de Fos ifadesinde önemli farklılıklar vardı (X2(3) = 13.89, p = 0.003), bu da iyi alım grubunu oluşturuyor (ortalama sıra farkı = 14.96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0.010), ancak yok olmada (ortalama sıra farkı = 12.86, p = 0.113) veya korku hatırlama grubunda (ortalama sıra farkı = 2.571, p > 0.999) ev hücre grubundan daha kötü değil (Şekil 4I)..Bununla birlikte, pPVT Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu (rs = 0,051, p = 0,825) (Şekil 4J).Son olarak, pPVT IL afferentlerindeki Fos ifadesinde, iyi ekstinksiyon, zayıf ekstinksiyon, korku hatıraları ve ev hücrelerinde (X2(3) = 12.34 p = 0.006) gruplar arasında önemli bir fark vardı, bu nedenle IL-'de iyi Fos ifadesi ekstinksiyon gruplarında (ortalama sıra farkı = 12.54, p = 0.014) ve ev hücresinde (ortalama sıra farkı = 12.89, p = 0.049) (Şekil 4K) olduğundan daha kötü ve pPVT içinde IL afferentleri ile önemli ölçüde korelasyonlu Aktivasyon ve yok olma iptali, daha iyi yok olma hatırlama, bu IL afferentlerinin daha fazla aktivasyonu ile ilişkilendirildi (rs = -0,438, p = 0,047) (Şekil 4L).
Sıçanlarda posterior paraventriküler talamusun (PVT) IL afferentlerinde fos aktivitesi arttı ve bu iyi bir gerileme gösterdi.(A) aPVT'de Fos ifadesinde gruplar arasında anlamlı fark yoktu.(B) aPVT'de Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(C) Korku hatırlama grubu, diğer tüm gruplara kıyasla IL afferentlerinde artan Fos ifadesi gösterdi.(D) IL aferentlerinde Fos ifadesi ile aPVT'de yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(E) mPVT'de Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı fark yoktu.(F) mPVT'de Fos ifadesi ile yok olma belleği arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) mPVT'de afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(H) IL aferentlerinde Fos ifadesi ile mPVT'de yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(I) Soyu tükenmiş bir grup, ancak başka hiçbir grup, ev kafesi grubuna kıyasla pPVT'de artan Fos aktivitesi gösterdi.(J) pPVT'de Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(K) İyi sönme grubu, zayıf sönme grubu ve ana hücre grubuna kıyasla IL afferent hücrelerinde artan Fos ekspresyonu gösterdi.(L) IL ileticilerindeki Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında önemli bir korelasyon vardır, bu nedenle iyi bir yok olma hatırlaması, IL aferentlerinde daha fazla Fos ifadesi ile ilişkilidir.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0.05，**p < 0.01。 *p < 0.05，**p < 0.01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Daha sonra sıçanların aCLA ve mCLA'sındaki global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi tüm gruplarda analiz edildi. aCLA'da (X2(3)=8.455, p=0.036) Fos ifadesinde iyi sönme, kötü sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında korku hatırlama grubu (Mean Rank Diff.=Mean Rank Diff.= 14.50, p = 0.049), ancak ne zayıf (Ortalama Sıra Farkı = 10.21, p = 0.373) ne de iyi ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 4.607, p > 0.999) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi ( Şekil 5A). aCLA'da (X2(3)=8.455, p=0.036) Fos ifadesinde iyi sönme, kötü sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında korku hatırlama grubu (Mean Rank Diff.=Mean Rank Diff.= 14.50, p = 0.049), ancak ne zayıf (Ortalama Sıra Farkı = 10.21, p = 0.373) ne de iyi ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 4.607, p > 0.999) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi ( Şekil 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис .5А). aCLA Fos ifadesinde iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücreleri grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 8.455, p = 0.036), böylece korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14.50, p = 0.049), ancak ne fakir (ortalama sıra farkı = 10.21, p = 0.373) ne de iyi ekstinksiyon grubu (ortalama sıra farkı = 4.607, p > 0.999), ana hücre grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil .5A) . Acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 显着 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0.036) ， 因此 恐惧 回忆组 (ortalama rütbe farkı = 14.50 ， p = 0.049） ， 但 无论是 差 （平均 = 10.21 ， p = 0.373） 还是 良好 灭绝 平均 秩差 秩差 = 4.607 ， P> 0.999） 组 都 显示 比 笼组 更 更 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 图 （（（（（（（（ . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 差异 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组Rütbe Fark = 14.50 ， p = p = p = p = p = 14. 0.049） ， 但 无论是 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). aCLA Fos ifadesinde (X2(3) = 8,455, p = 0,036) iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı, yani korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14,50), p = 0,049 ), ancak zayıf (ortalama sıra farkı = 10.21, p = 0.373) ve iyi sönme (ortalama sıra farkı = 4.607, p > 0.999) olan gruplar, ana hücre grubundan daha yüksek Fos ifadesi gösterdi (Şekil 5A). .(rs = 0.036, p = 0.876) (Şekil 5B)'deki global Fos ifadesi veya IL aCLA afferent hücrelerindeki Fos ifadesi (rs = -0.282, p = 0.215) ve yok olma hatırlaması (Şekil 5B) arasında anlamlı bir ilişki yoktu..5D), aCLA IL afferentlerindeki Fos ifadesinde iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında da anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 6.722, p = 0.081) (Şekil 5C)..). Daha sonra, mCLA'daki Fos ifadesinde (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra Farkı) . = 12.93, p = 0.038), ancak ne zayıf ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 5.143, p > 0.999) ne de korku hatırlama grupları (Ortalama Sıra Farkı = 14.00, p = 0.063) mCLA'da önemli ölçüde daha fazla Fos ifadesi göstermedi ev kafes grubuna göre (Şekil 5E). Daha sonra, mCLA'daki Fos ifadesinde (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) iyi yok olma, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında önemli bir fark vardı, öyle ki iyi yok olma grubu (Ortalama Sıra Farkı) . = 12.93, p = 0.038), ancak ne zayıf ekstinksiyon (Ortalama Sıra Farkı = 5.143, p > 0.999) ne de korku hatırlama grupları (Ortalama Sıra Farkı = 14.00, p = 0.063) mCLA'da önemli ölçüde daha fazla Fos ifadesi göstermedi ev kafes grubuna göre (Şekil 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos в mCLA. O zaman mCLA Fos ifadesinde (X2(3) = 10.12, p = 0.018) iyi yok olma, zayıf yok olma, korku anıları ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark vardı, böylece iyi sönme grubu (ortalama fark sıralaması = 12.93, p = 0.038), ancak ne zayıf ekstinksiyon grupları (ortalama sıra farkı = 5.143, p > 0.999) ne de korku hatırlama grupları (ortalama sıra farkı = 14.00, p = 0.063) mCLA'da önemli ölçüde daha büyük Fos ifadesi göstermedi.ev kafes grubu (Şekil 5E) ile karşılaştırıldığında.接下来 ， 在 mcla 中 的 的 退组 、 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 显着 显着 显着 显着 差异 差异 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 差异 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， （（（（（（（（（（（， 良好 良好 良好 （（（（（（（（（（（ （（（ Ortalama Sıra Farkı .= 12.93, p = 0.038) ， 但 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 = 5.143 ， 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 均 未 未 显示 出 更 多 的 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 表达 的 的 的 的相对于家庭笼组（图5E）. = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 回忆组 （平均 秩差 秩差 = 14.00 ， p = 0.063） 未 显示 出 更 多 的 的 的 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) Fos Fos'un en iyi ihtimalle домашней клеткой (Рисунок 5E). Ayrıca, iyi sönme grubu, zayıf yok olma grubu, korku geribildirim grubu ve ev hücresi grubu arasında mCLA'daki Fos ifadesinde anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 10.12, p = 0.018), dolayısıyla iyi yok olma (ortalama sıra farkı = 12.93, p = 0.038), ancak mCLA'da ne zayıf sönme (ortalama sıra farkı = 5.143, p > 0.999) ne de korku hatırlama grubu (ortalama sıra farkı = 14.00, p = 0.999) = 0.063) daha iyi gösterdi Ana hücre grubuna kıyasla Çoklu Fos ifadesi (Şekil 5E).Bununla birlikte, mCLA'da (rs = 0.321, p = 0.156) (Şekil 5F) veya afferent IL mCLA hücrelerinde (rs = -0.121, p = 0.602) ve ekstinksiyon hatırlamasında (Şekil 5H) global Fos ifadesi, arasında anlamlı bir fark yoktur. iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve IL mCLA afferent hücrelerinde Fos ifadesi için bir ana hücreye sahip gruplar (X2(3)=4,923, p=0,178) (Şekil 5G).
Fos aktivitesi, iyi tükenme hafızası olan sıçanlarda orta klostrumda yükselmiştir.(A) Diğer gruplar değil, korku hatırlama grubu, aCLA'daki ana hücre grubuna kıyasla artan Fos aktivitesi gösterdi.(B) aCLA'daki Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(C) IL afferent aCLA hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(D) IL aferentlerinde Fos ifadesi ile aCLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(E) İyi soyu tükenmiş grup, ancak diğer gruplar, ev hücre grubuna kıyasla mCLA'da artan Fos aktivitesi gösterdi.(F) mCLA'da Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) IL mCLA afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(H) IL aferentlerinde Fos ifadesi ile mCLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0.05。 *p < 0.05。 *r < 0,05. *p < 0,05.
Daha sonra, tüm sıçan gruplarında mBLA ve pBLA'daki global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi analiz edildi.mBLA'da Fos ifadesinde iyi ekstinksiyon, zayıf ekstinksiyon, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı fark yoktu (X2(3)=0,944, p=0,815) (Şekil 6A).IL mBLA afferent hücrelerinde iyi gerileme, kötü gerileme, korku hatırlama ve ev hücresi Fos ekspresyonu olan gruplar arasında da anlamlı bir fark yoktu (X2(3)=0.518, p=0.915) (Şekil 6C).Ek olarak, mBLA'daki global Fos ifadesi (rs = 0,126, p = 0,588) (Şekil 6B) ile IL mBLA afferent hücrelerindeki Fos ifadesi (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p) arasında anlamlı bir ilişki yoktu. = 0.385).p = 0.385).Şekil 6D) ve yok olma hatırlama.Ayrıca pBLA'daki Fos ifadesinde (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (Şekil 6E) iyi sönme, zayıf yok olma, korku hafızası ve ev hücre gruplarında anlamlı bir fark yoktu ve ayrıca önemli bir fark yoktu. pBLA'da İyi.IL afferent hücrelerde (X2(3)=1,954, p=0,582) (Şekil 6G).Son olarak, pBLA'da global Fos ifadesi (rs = 0.070, p = 0.762) (Şekil 6F) ve pBLA IL afferent hücrelerinde (rs = 0.122, p = 0.597) ve yok olma hatırlamasında (Şekil 6H) Fos ifadesi.
Yok olma üremesindeki bireysel farklılıklar, bazolateral amigdaladaki Fos ifadesindeki farklılıklarla eşleştirilmedi.(A) mBLA'da Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı fark yoktu.(B) mBLA'da Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(C) IL mBLA afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(D) IL afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu ile mBLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(E) pBLA'da Fos ifadesinde gruplar arası anlamlı fark yoktu.(F) pBLA'da Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) Afferent IL pBLA hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(H) IL afferent hücrelerinde Fos ekspresyonu ile pBLA'da yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder.
Son olarak, tüm sıçanlarda mvHPC ve pvHPC'de global ve IL projeksiyonuna özgü Fos aktivitesi analiz edildi. mvHPC (X2(3) = 8.056, p = 0.045) Fos ifadesinde iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında iyi sönme (Mean Rank Diff. = 13.29) olacak şekilde anlamlı bir fark vardı. , p = 0.031), ancak ne zayıf yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 6.857, p > 0.999) ne de korku hatırlama (Ortalama Sıra Farkı = 8.000, p = 0.864) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil. 7A). mvHPC (X2(3) = 8.056, p = 0.045) Fos ifadesinde iyi sönme, zayıf sönme, korku hatırlama ve ev kafesi grupları arasında iyi sönme (Mean Rank Diff. = 13.29) olacak şekilde anlamlı bir fark vardı. , p = 0.031), ancak ne zayıf yok olma (Ortalama Sıra Farkı = 6.857, p > 0.999) ne de korku hatırlama (Ortalama Sıra Farkı = 8.000, p = 0.864) grupları, ev kafesi grubundan daha fazla Fos ifadesi göstermedi (Şekil. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). İyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücreleri (X2(3) = 8.056, p = 0.045) ve çok iyi sönme (ortalama sıra farkı = 13.29) olan gruplar arasında mvHPC Fos ifadesinde anlamlı bir fark vardı, p = 0.031), ancak ne zayıf sönme grubunda (ortalama sıra farkı = 6.857, p > 0.999) ne de korku hatırlama grubunda (ortalama sıra farkı = 8.000, p = 0.864) Fos ifadesi ev grubundan daha yüksek değildi.hücre (Şekil 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异（X2 (3) = 8.056, p = 0.045），因此良好消退（平均秩差= 13.29） ，p = 0.031 ） ， 但 无论是 （平均 秩差 = 6.857 ， P> 0.999） 还是 恐惧 回忆 （秩差 秩差 组都 显示 显示 出 出 比 家庭 更 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 MVHPC 中 fos 表达 的 消退 、 消退 恐惧 和 和 家庭 笼组 存在 差异 （（（（（（（（（（（（（（（）））） 之间 显着 差异）） 良好 良好 （（秩差 秩差）） ， 良好 （（秩差 秩差）））））））））） ， 但 无论是 弱消退 平均 秩差 秩差 = 6.857 ， P> 0.999） 还 是 恐惧 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 组 都 出 家庭 笼组 的 fos 图 图 图 。。。。 ) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). mvHPC'de Fos ifadesi için iyi, kötü, korku hatırlama ve ev hücresi grupları arasında anlamlı bir fark vardı (X2(3) = 8,056, p = 0,045) ve bu nedenle iyi bir regresyon (ortalama sıra farkı = 13,29), p = 0.031), ancak zayıf ekstinksiyon (ortalama sıra farkı = 6.857, p > 0.999) ve korku anıları (ortalama sıra farkı = 8.000, p = 0.864) olan gruplar, evde kafesteki gruptan daha yüksek Fos ifadesi gösterdi (Şekil 2).7A).Ancak anlamlı bir fark yoktu (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Şekil 7C).Ek olarak, mvHPC'deki global Fos ifadesi (rs = -0.233, p = 0.309) (Şekil 7B) ile mvHPC afferent IL hücrelerindeki Fos ifadesi (rs = 0.056, p = 0.810) (Şekil 7D) arasında anlamlı bir ilişki yoktu.ve kaybolmayla ilgili bir rapor.Ayrıca, pvHPC'de Fos ifadesinde (X2(3) = 3.623, p = 0.353) (Şekil 7E) iyi sönme, zayıf yok olma, korku hatırlama ve ev hücre grupları arasında anlamlı bir fark yoktu ve önemli bir fark yoktu.pvHPC afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonunun iyi regresyonu, zayıf regresyon, korku hafızası ve ev hücre gruplarında fark (X2(3)=3,871, p=0,276) (Şekil 7G).Son olarak, pvHPC global Fos ifadesi (rs = −0,127, p = 0,584) (Şekil 7F) ile IL-afferent pvHPC hücrelerinde Fos ifadesi (rs = 0,176, p = 0,447) ve yok olma hatırlaması (Şekil 7F) arasında anlamlı bir ilişki yoktu. ).7H).
Fos ekspresyonu, sıçanların ventral hipokampüsünde yükselir, bu da iyi bir hafıza yok oluşuna işaret eder.(A) İyi soyu tükenmiş grup, ancak diğer gruplar değil, ev hücre grubuna kıyasla mvHPC'de artan Fos ekspresyonu gösterdi.(B) mvPHC'de Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(C) mvHPC afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(D) IL afferentlerinde Fos ifadesi ile mvHPC'de yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(E) pvHPC'de Fos ifadesinde gruplar arasında anlamlı fark yoktu.(F) pvHPC'de Fos ifadesi ile yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.(G) pVHPC afferent IL hücrelerinde Fos ekspresyonu, gruplar arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi.(H) IL aferentlerinde Fos ifadesi ile pvHPC'de yok olma hatırlaması arasında anlamlı bir ilişki yoktu.Hata çubukları, ortalamanın standart sapmasını temsil eder. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0.05。 *p < 0.05。 *r < 0,05. *p < 0,05.Tüm bölgeler için birincil analizimiz, ön-arka eksen boyunca çöken her bir bölgeyi de analiz etmemize rağmen, ön-arka eksen boyunca üç düzeyde karşılaştırma gösterdi.Bu analizlerin sonuçları tablo 1'de sunulmaktadır.
Burada, nesli tükenme hatırlamasındaki bireysel farklılıkların, alt limbik korteksteki farklı afferent aktivite kalıplarına yansıyıp yansımayacağını test ettik.Bu amaçla, sönme tekrarından sonra paraventriküler talamus, klostrum, bazolateral bademcik ve ventral hipokampustan IL projeksiyonlarındaki Fos aktivitesini değerlendirdik.IL-projeksiyonlu hücrelerde, PVT'nin arka bölgesinde, nesli tükenmesi zayıf olan sıçanlara kıyasla iyi bir yok olma hatırlama sergileyen sıçanlarda daha yüksek aktivite bulduk.Klavikula çekirdeği, ventral hipokampus veya bazolateral bademcikten gelen IL afferentlerinde fark yoktu.IL-çıkıntılı hücrelere ek olarak, sıçan klostrumu ve ventral hipokampusun seçilmiş bölgelerinde iyi çözünürlükle artan nöral aktivite gözlendi.Sonuçlarımız, başarılı yok olma belleğinin, klostrum ve ventral hipokampustaki IL ve IL hedeflemeyen hücrelere yönelik spesifik PVT projeksiyonları tarafından organize edildiğini göstermektedir.
PVT IL tahmininin, iyi yok olma hatırlaması gösteren sıçanlarda aktif olduğunu bulduk; bu, PVT'nin yok olma hatırlaması için gerekli olduğunu gösteren yakın tarihli bir çalışmayla tutarlıdır.Bu çalışma, alt bölgeye özgü manipülasyonlar kullanmadı, ancak hem yan merkezi amigdala üzerindeki PVT projeksiyonlarının hem de PVT üzerindeki IL projeksiyonlarının yok oluşu yeniden üretmek için gerekli olduğunu gösterdi.Sonuçlarımız, IL-PVT-CeL zincirine ek olarak, söndürme geri çağırma için IL'ye PVT sonrası bir girişin de gerekli olabileceğini göstermektedir.Böylece, hem götürücü hem de götürücü IL bağlantılarının, yok oluşun yeniden üretilmesinde yer aldığı ortaya çıkıyor.Bir sonraki önemli adım, pPVT'nin nöral devre seviyesinde yok olma yeniden üretimine işaret etmesine neyin neden olduğunu belirlemektir.IL ile ilişkiye ek olarak, önceki kanal izleme çalışmaları31,32 pPVT'nin ekstinksiyon öğrenme33,34,35,36 ile ilişkili ventral periakuaduktal griden (vPAG) girdi aldığını göstermiştir.Her ne kadar vPAG'ın yok olma hatırlamasındaki rolü belirlenmemiş olsa da, pPVT'nin vPAG tarafından öngörülmesi, yoğunlukları ve her iki bölgenin de önceki korku yok olma kanıtlarını üretmeye dahil olması nedeniyle çekici bir adaydır.
PVT sonuçlarımızın bir diğer önemli yönü de ön-arka eksenleri boyunca özelleşmiş olmalarıdır.Çarpıcı bir şekilde, IL'deki PVT projeksiyonunun nöronal aktivitesi, zıt davranışsal durumla ilişkilidir; öyle ki, IL'deki PVT öncesi projeksiyon aktivitesi, korku hatırlama ile ilişkilendirilirken, pPVT projeksiyonu, başarılı hatırlama sönmesinden (yani korku) sonra aktiftir.PVT içindeki bu işlevsel heterojenlik, önceki çalışma göz önüne alındığında şaşırtıcı değildir [37'de tartışılmıştır].PVT'deki fonksiyonel dağılımın çarpıcı bir örneği, son zamanlarda PVT'deki spesifik hücre tiplerinin özelliklerini karakterize eden bir çalışmada ortaya çıkmıştır.Bu çalışma, DRD2 eksprese eden dopamin hücrelerinin ağırlıklı olarak pPVT'de eksprese edildiğini, ön ayak korteksini innerve ettiğini ve caydırıcı uyaranlara yanıt verdiğini göstermektedir.İkinci hücre popülasyonu ağırlıklı olarak aPVT'de ifade edilir ve düşük fizyolojik uyarılma durumuna geçişi işaretler ve alt ekstremitelerin korteksini innerve eder.IL-projeksiyonlu aPVT hücreleri korku hatırlama sırasında aktifken, pPVT projeksiyonları aktif olduğundan ve hayvanlar düşük düzeyde korku gösterdiğinden, sonuçlarımız bu modele pek uymuyor.Görünen tutarsızlık için en az iki olası açıklama vardır.İlk olarak, tanımlanan hücre tipleri, yalnızca TVV'nin bir ön-arka bölgesinde yer almamaktadır.Bu nedenle, iyi bir yok olma hafızasına sahip sıçanlardaki aktif IL-projekte eden pPVT hücreleri, aPVT'de saptanma olasılığı daha yüksek olan ve düşük uyarılma durumuna geçişi işaret eden bir hücre sınıfına ait olabilir.Aynı şey, korku hafızasından sonra aktive olan aPVT'deki IL-projeksiyon yapan hücreler için de geçerli olabilir.İkincisi, önceki izleme çalışmaları, IL3-çıkıntılı pPVT'lerin varlığını tanımlamıştır, ancak bazıları DRD2-içeren hücrelerden türetilmiş gibi görünse de, diğer hücre türleri IL'ye yansıtabilir ve söndürmenin başarılı bir şekilde yeniden üretilmesi üzerine aktive olabilir.
Bu çalışmanın amacı, farklı yok olma fenotipleri sergileyen fareler arasındaki farklılıkları belirlemek olsa da, bu deneyler aynı zamanda korku hafızası mekanizmalarıyla ilgili yeni verileri de ortaya çıkardı.İlginç bir şekilde, korku hafızalı sıçanlarda ön CLA'da artmış Fos aktivitesi bulduk.
Klavikula, kortikal iletişimin merkezi olarak konumlanmıştır ve duyusal bütünleşmeden dikkat ve uykuya kadar değişen süreçlerde yer alır40,41,42,43.Klostrumun korku koşullandırmasına veya korku ifadesine nasıl dahil olduğuna dair sınırlı kanıt vardır, ancak daha önceki araştırmalar, bağlamsal korku ifadesinin klostrumdaki Fos etkinliğine dahil olduğunu göstermiştir.Bağlamsal korku şartlandırması sırasında entorinal kortekse yönelik atrezi projeksiyonlarının engellenmesinin, korku ifadesine olan ihtiyaçları test edilmemiş olmasına rağmen, uzun süreli hafıza oluşumunu bozduğu yakın zamanda bildirilmiştir.Aynı çalışmada, hayvanlar yeni bir ortama maruz bırakıldığında, tanıdık bir ortama maruz bırakılan farelere kıyasla artan Fos aktivasyonu gözlemlendi.Bunu göz önünde bulundurarak, burada bildirdiğimiz CLA aktivasyonu, hatırlama korkusundan ziyade test sırasında yeni kameraya maruz kalma nedeniyle olabilir.Kilitlerin korku ve durumsal işlemedeki işlevini daha doğru bir şekilde karakterize etmek için, gelecekteki çalışmalar hedeflenen kilit manipülasyonunu kullanmalıdır.
Önceki çalışma, PVT'nin korku hafızası ifadesi ile ilişkili olduğunu göstermiş olsa da,45,46,47, koşullanmadan 48 saat sonra korkuyu hatırladıkları farelerde toplam Fos ifadesinde herhangi bir değişiklik gözlemlemedik.Bu fark, şartlandırmanın gerçekleştiği bağlamda önceki çalışma testi ayrık ipuçları korkusu da dahil olmak üzere çeşitli faktörlerle açıklanabilir, oysa bizim deneyimizde test yeni bir odada yapıldı.Ek olarak, önceki çalışmada 90 dakikalık bir zaman noktası kullanılırken, testten 60 dakika sonra hayvanlarımıza ötenazi uyguladık.Son olarak daha önceki çalışmalarda hayvanların iştahla tepki verdiği bir odada test yapılırken, bizim çalışmamızda fareler iştahsız olarak test edildi.Bu, bir dereceye kadar koşullu ketlemeye izin verirken, hayvanların ipuçlarından korkup korkmadıklarını test ederken yiyecek elde etmek için baskıyı engellemelerine izin verilmesinin, önemli bir uyarıcı faktör olan motivasyonel çatışma (yani, korkuya karşı ödül) yarattığına dair kanıtlar vardır.katılım PVT48, 49. .
Bazolateral amigdalanın korku yok oluşunun edinilmesinde rol oynadığı bilinmektedir50,51 ve IL'ye yönelik BLA projeksiyonlarının da bu sürece dahil olduğuna dair kanıtlar vardır23.Ancak, BLA ve bağlantılarının yok olma dönüşüne dahil olup olmadığı net değil.Görüntüleme çalışmaları23,28, silik anıları hatırlayan hayvanlarda BLA aktivitesinin arttığını göstermiştir.Önceki çalışmalarımız, iyi ve kötü yok olma fareleri arasında BLA aktivasyonunda bir fark göstermezken, buradaki sonuçlarımız, yok olma hatırlamanın genellikle BLA'yı veya BLA IL'yi tahmin etmede aktivasyonu etkilemediğini göstermektedir.Bulgularımızla tutarlı olarak, devre manipülasyon çalışmaları, BLA'ya IL girdilerinin yok olma öğrenimi için önemli olduğunu öne sürmesine rağmen, yok olma hatırlaması için gerekli değildir.Bununla birlikte, son kanıtlar, neslinin tükenmesini yeniden üretmek için BLA'daki belirli hücre türlerinin gerekli olduğunu gösterdiğinden, BLA'nın rolü tamamen göz ardı edilemez.
Önceki lezyon, ilaç ve görüntüleme çalışmaları, bu alanı korku ifadesi ve/veya geri alma sonrasında korkunun yeniden konsolidasyonu54,55,56,57 ile ilişkilendirdiğinden, özellikle korku hatırlama BLA'da Fos aktivasyonuna neden olmadı.Burada sunulan veriler, amigdalanın bazal ve lateral alt çekirdeğini birleştirir ve önceki veriler, korku ifadesinin, lateral çekirdeğin dorsal tarafındaki Fos aktivitesini yönlendirdiğini gösterir.Temel ve yanal verileri ayrı ayrı analiz ettik, ancak her iki durumda da fark yoktu (veriler gösterilmedi) ve burada sunduğumuz verilerde her iki alan da çöktü.Lateral amigdalanın alt bölgelerini analiz etmedik, bu nedenle bu alandaki belirli değişiklikler maskelenebilir.BLA'daki Fos aktivitesinde değişiklik olmamasının bir başka olasılığı, koşullanmaya kıyasla korku anılarının zamanlamasıdır.Önceki bazı çalışmalar, BLA'nın korku ifadesine katkısının şartlandırmadan sonra zamanla azaldığını göstermiştir, öyle ki ifade, şartlandırmadan 24 saat sonra BLA'ya bağımlıdır ancak 7 günde bağımsızdır (ref. 45, ancak bkz. 58).eğitimden 48 saat sonra meydana geldi ve bu zaman noktasında Fos aktivitesinde değişiklik olmaması, muhtemelen BLA'nın korku ifadesine katılımındaki zamana bağlı değişiklikleri yansıtıyor.
Son olarak, başarılı yok olma hafızasının ventral hipokampus ile ilişkili olduğuna dair kanıtlar bulduk.Arka bölgede aynı model görülmediğinden, bu "ara" vHPC'lerin özelliğidir.Önceki çalışmayla tutarlı olarak, afferent vHPC IL'lerde Fos aktivasyonunda herhangi bir değişiklik bulamadık.CS solmanın meydana geldiği bağlamın dışında meydana geldiğinde korkunun gerçekleşmesi için vHPC28,60,61'in gerekli olduğuna ve bunun en azından kısmen vHPC'nin IL13'e girişine bağlı olduğuna dair önemli kanıtlar vardır.Bu önceki sonuçlara dayanarak, zayıf solmanın vHPC'nin artan tahmin edilen IL aktivitesi ile ilişkili olmasını bekleriz.Bununla birlikte, IL ile yansıtılan retrograd etiketli vHPC'lerde Fos aktivitesinde veya vHPC'lerde etiketlenmemiş hücrelerde fark olmadığı için durum böyle değildi.Bu, solma bağlamında solmayı hatırlayamamanın, yenilenme korkusundan farklı bir mekanizmayı tetikleyebileceğini düşündürmektedir.
Bazı yapısal tasarım ve analiz sınırlamalarını ve bunların sonuçlarımızı nasıl etkilediğini not etmek önemlidir.İlk olarak, nesli tükenme hatırlama puanlarına göre hayvanları üst ve alt üçte bire, fareleri "iyi" ve "kötü" olarak ayırdık.Bu, hayvanları dağılımın ortasından ayrı gruplara ayıran grup şemalarından veya medyanla ayırma veya farelerin üst ve alt üçte birinin karşılaştırılması gibi, hayvanları dağılımın ortasından dışlayan grup şemalarından kaçınmak için yapılır. .bu durumdan kaçınmak istiyoruz çünkü medyan bölme, modellemeye çalıştığımız travmaya verilen insan tepkilerinin değişkenliğini yansıtmamaktadır.Ek olarak, sıçanların üst ve alt üçte birlik kısmını karşılaştırmak, benzer büyüklükteki grupları karşılaştırmamıza izin verirken, bu yaklaşım, dağılımın merkezindeki hayvanları göz ardı eder ve yaralanmaya verilen tepkilerdeki değişkenliği doğru bir şekilde yansıtmaz.Yöntemimiz, heterojen varyans ve eşit olmayan örneklem büyüklüklerine sahip grupları karşılaştırma sorunlarından muzdarip olsa da, taklit etmeye çalıştığımız şeyi alternatif yöntemlerden daha iyi yakalar.
Burada sunulan sonuçlar, yok olma hatırlamasındaki bireysel farklılıkların nöral devre aktivitesindeki farklılıklara nasıl yansıdığını daha iyi anlamamıza yardımcı olur.Bulgularımız, aşırı korku ve korku tepkilerini ortadan kaldıramama ile ilişkili olduğu bilinen travma sonrası stres bozukluğu ile ilgili olabilir.Yok olma hatırlamasındaki farklılıkların, IL'ye yansıtılan içsel ve dışsal nöral aktivitedeki farklılıklar ile ilişkili olduğunu gösterdik.Bu farklılıklar, ön-arka eksen boyunca farklı bölgelere dağılmış olup, beyin fonksiyonunu alt bölge seviyesinde değerlendirmenin önemini daha da vurgulamaktadır.Mevcut yöntemin dezavantajları, çalışmanın alaka düzeyini ve erkek kemirgenlere odaklanmayı içerir.Gelecekteki araştırmalar, dişi kemirgenlerde öğrenmenin altında yatan nörobiyolojik mekanizmaları belirlemeli ve nedensel çıkarımlar yapmak için yöntemler kullanmalıdır.
Mevcut çalışmada kullanılan ve/veya analiz edilen veri setleri, makul talep üzerine ilgili yazarlardan temin edilebilir.
Pavlov IP Koşullandırma: serebral korteksin fizyolojik aktivitesi üzerine bir çalışma.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Öğrenme ilkelerini travma sonrası reaksiyonların tedavisine uygulamak. Rothbaum, BO, & Davis, M. Öğrenme ilkelerini travma sonrası reaksiyonların tedavisine uygulamak.Rotbaum BO ve Davis M. Öğrenme ilkelerini travma sonrası reaksiyonların tedavisine uygulamak.Rotbaum BO ve Davis M. Travma sonrası reaksiyonların tedavisinde öğrenme ilkelerinin uygulanması.Yüklemek.New York Koleji.Bilim.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz kalma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın bir standart. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz kalma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın bir standart.Rauch SA, Eftekhari A. ve Ruzek DI Maruz bırakma tedavisine ilişkin bir inceleme: travma sonrası stres bozukluğu için altın standart tedavi. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Maruz bırakma terapisinin gözden geçirilmesi: TSSB tedavisi için altın standart.Rauch, SA, Eftekhari, A. ve Ruzek, DI Maruz kalma tedavisine ilişkin bir inceleme: travma sonrası stres bozukluğu için altın standart tedavi.J. Rehabilitasyon.rezervuar geliştirme 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Uzun süreli maruz kalma tedavisi: geçmiş, bugün ve gelecek.Anksiyetenin Bastırılması 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Bay Millard ve ark.Travma sonrası stres bozukluğunda hafıza kaybının varoluşsal ve edinilmiş nedenleri: ikiz bir çalışmanın bulguları.J. Psikiyatrist.depolama tankı.42(7), 515-520 (2008).
Bay Millard ve ark.Travma sonrası stres bozukluğunda kaybolan anıları hatırlayamamanın nörobiyolojik temeli.Biyoloji.Psikoloji.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkuda bireysel farklılıklar: İzolasyon korku reaktivitesi ve korkudan kurtulma fenotipleri. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkuda bireysel farklılıklar: İzolasyon korku reaktivitesi ve korkudan kurtulma fenotipleri.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ve LeDoux, JE Korkuda bireysel farklılıklar: korku reaktivitesinin fenotiplerini ve korkunun eski haline getirilmesini ayırt etmek. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Korkuda bireysel farklılıklar: korku tepkisinin izolasyonu ve korkudan kurtulma tablosu.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ve LeDoux, JE Korkuda bireysel farklılıklar: korku tepkilerinin izolasyonu ve korkudan kurtulma fenotipi.J. Travma.basınç 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasında bireyler arası değişimi öngörür. Russo, AS & Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasında bireyler arası değişimi öngörür.Russo, AS ve Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasındaki bireysel farklılıkları öngörür. Russo, AS & Parsons, RG Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS ve Parsons, RG Sıçanlarda akustik irkilme tepkisi, korkunun yok olmasındaki bireysel farklılıkları öngörür.Nörobiyoloji.ders çalışma.Hafıza.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Korku sönmesinin hatırlanmasındaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktive olan protein kinazın fosforilasyonu ile ilişkilidir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Korku sönmesinin hatırlanmasındaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktive olan protein kinazın fosforilasyonu ile ilişkilidir.Russo, AS, Lee, J. ve Parsons, RG Korku hatırlama yok oluşundaki bireysel değişkenlik, infralimbik kortekste mitojenle aktive olan protein kinaz fosforilasyonu ile ilişkilidir. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Korkunun kaybolmasının hatırlanması, periferik fosforlaştırmadaki bireysel farklılıklarla ilişkilidir.Russo, AS, Lee, J. ve Parsons, RG Hatırlama sırasında korku sönmesindeki bireysel farklılıklar, alt ekstremite korteksinde mitojenle aktive olan protein kinazların fosforilasyonu ile ilişkilidir.Psikofarmakoloji 236(7), 2039–2048 (2019).